支原体SPG培养基的具体配置步骤是什么？

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支原体SPG培养基

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同花顺

支原体（Mycoplasma）是一类无细胞壁的原核细胞型微生物，对培养基的要求较高，常用的培养基为SPG（Simulation of Pelvic Ground）培养基。以下是SPG培养基的配置步骤：
### 材料：
- 胰蛋白胨（tryptone）
- 葡萄糖（glucose）
- 酵母提取物（yeast extract）
- 氯化钠（NaCl）
- 磷酸氢二钾（K2HPO4）
- 硫酸镁（MgSO4·7H2O）
- 蒸馏水
- 0.1N盐酸或0.1N氢氧化钠（用于调整pH）
### 配置步骤：
1. **称量和溶解**：
   - 称取10g胰蛋白胨。
   - 称取10g葡萄糖。
   - 称取5g酵母提取物。
   - 称取5g氯化钠。
   - 称取2.5g磷酸氢二钾。
   - 称取0.5g硫酸镁。
2. **溶解**：
   - 将上述称取的成分溶解于大约500ml的蒸馏水中。
3. **调整pH**：
   - 使用0.1N盐酸或0.1N氢氧化钠调整培养基的pH值至7.4。
4. **定容**：
   - 将溶解后的溶液转移到容量瓶中，并用蒸馏水定容至1000ml。
5. **过滤**：
   - 使用0.22微米的无菌滤膜过滤培养基，以确保无菌。
6. **分装**：
   - 将过滤后的培养基分装到无菌的试管或培养瓶中。
7. **灭菌**：
   - 对分装好的培养基进行高压蒸汽灭菌（通常为121℃，15分钟）。
8. **储存**：
   - 灭菌后的培养基可以在无菌条件下储存于冰箱中，避免光照。
### 注意事项：
- 在配置过程中，要确保所有的操作均在无菌条件下进行，以防污染。
- SPG培养基的成分和比例可能根据不同的支原体种类和实验室的具体要求有所调整。
- pH值的调整非常关键，需要准确。
在配置培养基时，应遵循实验室的安全规程，穿戴适当的个人防护装备。如需更详细的操作指南或具体配方，请参考实验室的标准操作程序或相关文献。