流式细胞术之细胞凋亡检测

笑看风云

前两天在朋友圈看到一个笑话，冻死个人用英语怎么说？Welcome to Hangzhou。大家的秋裤都穿起来了嘛。











今天我将为大家介绍一下流式细胞术的另一个应用，就是检测细胞凋亡。
细胞凋亡相对细胞周期来说，比较省事省时，但是它比较心急，放不久，处理完以后2个小时内一定要检测完毕，不然实验数据可能就偏差较多啦。
01
跟大家唠唠细胞凋亡检测的基本实验步骤：
  1. 按照实验方案处理细胞；

  2.消化离心收集细胞（按平常传代时收集细胞的离心条件即可）至离心管中；
  3. 用PBS洗2遍；
  4. 用双蒸水稀释5*Binding Buffer为1*Binding Buffer，每管加入500μl 1*Binding Buffer 重悬细胞；
  5. 每管加入5μl Annexin V-FITC和10μl PI染料，混匀；
  6.室温避光孵育5min；
  7.过膜，流式细胞仪检测
02
结果分析：
最终的结果图主要将细胞分为3种状态的细胞，左下：存活的细胞；右下：早期凋亡的细胞；右上：晚期凋亡的细胞。大家可以根据三种状态下相应的细胞百分比绘制柱状图进行分析。



03
注意事项：

• 要准备单染管喔，仪器需要调补偿；
  
• 对待细胞轻柔一点啦，然后动作尽量要快，细胞们也想早早完成它们的使命；
  
  

  3.有疑问或者有建议可以通过公众号私信我。



小小请求：如果大家觉得这个公众号可以发挥一点点小作用的话，能不能帮实验汪多多宣传一下呀，您的一次转发，我的万分感谢。
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END

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