细胞培养技术——细胞换液

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在我们培养细胞的过程中，换液是一项常规的操作，通过换液清除掉细胞在生长过程中产生的代谢废物，补充新鲜的含血清培养基，使细胞能够正常生长。今天我们简单讲讲换液操作

  首先，我们需要准备好相应的实验器材：装有75%医用消毒酒精的酒精喷壶、PBS缓冲液、含血清培养基、巴氏吸管、移液器、废液缸。至于其他的超净台，培养箱等都是一个细胞间的基础设施，这里就不一一列出。

  然后，我们需要把我们准备的器材放入超净台，打开紫外照射灭菌，值得注意的是若是培养的细胞对温度比较敏感，可以将含血清的培养基瓶子放入37℃的水浴箱使得培养基温度在37℃，再转移到超净台紫外灭菌，当然一般的细胞对培养基的温度不是很敏感，不用对培养基加温也是可以的。另外，细胞培养间也需要紫外照射半小时左右。

紫外照射灭菌后，我们应该穿好灭菌服，戴好灭菌手套和口罩，从培养箱取出细胞培养瓶，用酒精喷壶在培养瓶表面喷洒75%酒精消毒，转移培养瓶到超净台，打开盖子，轻轻吸出旧的培养液，可用移液器加入新鲜含血清培养基，注意一定不要从细胞贴壁面加入培养基，应从侧壁加，动作轻柔，以免冲落细胞。加好培养基后，盖上盖子，在培养瓶上做标记，注明换液时间，细胞种类，操作人员等信息。在放入培养箱之前应再次用酒精喷一喷培养瓶表面，然后应记得整理操作台，用酒精擦拭超净台台面，清理废液和垃圾。

注意，全程严格无菌操作！

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