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[分享] 培养大肠杆菌除了LB培养基,还有什么其他的培养基吗?

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发表于 2024-9-11 17:10 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2024-9-11 17:11 | 显示全部楼层
培养大肠杆菌最常用的是LB培养基,LB培养基中的胰蛋白胨和酵母浸粉为目标菌生长提供氮源、维生素和生长因子,氯化钠维持渗透压平衡。
除此之外也有多种培养基可以满足大肠杆菌的生长需求,由于不同的培养基的配方不同,对大肠杆菌的培养效率等也有差别,通常可以根据实验目的选取合适的培养基。
例如,TB培养基又称超级肉汤培养基,是分子生物学常用的大肠杆菌培养基。与LB培养基相比 ,TB培养基营养密度大,含有丰富的生长因子等,因此TB培养基可以有效提高菌体密度和蛋白表达量。
SB培养基,也是一种高营养密度的培养基,同TB培养基一样,适合菌体的高密度培养,适用于质粒提取和蛋白表达实验。
SOB培养基,相比于LB培养基,含有两倍胰蛋白胨和镁离子,镁离子有助于高密度培养,因此在SOB培养基中,大肠杆菌有比较高的转化效率,因此常用于感受态细胞的制备。
SOC培养基在SOB的基础上,添加了葡萄糖作为分解代谢抑制物,可以有效减少外源基因的表达,从而降低细胞生长压力,因此SOC培养基非常适合用于基因工程大肠杆菌培养。
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发表于 2024-9-11 17:11 | 显示全部楼层
如果你是从事微生物实验研究的学者或者实验室科技人员,那么你一定不会陌生大肠杆菌这个实验室里经常用到的细菌,特别是在分子生物学、遗传学、克隆和表达等方面,大肠杆菌作为主流生物学研究对象,被广泛应用于基因克隆、表达调控、蛋白质结构和功能研究等方面。然而,如何才能有效地培养大肠杆菌,是每一位从事这一领域的科技人员们十分关心的问题。除了常见的LB培养基,还有哪些其他的培养基可以用来培养大肠杆菌呢?
1. SOC培养基
SOC培养基是一种高效的复合培养基,由于其钠离子浓度高,能够加速大肠杆菌的恢复生长过程。在感受态电转化操作中,SOC培养基也是必不可少的培养基。此外,SOC培养基中还含有较高的葡萄糖浓度和酵母提取物等营养成分,可以提供大肠杆菌快速生长和代谢所需的养分。
2. TB培养基
TB培养基是一种富含碳源和氮源的培养基,常常被用来培养需要大量表达的重组蛋白。TB培养基中蛋白胨含量高,可以满足大肠杆菌高效表达大量蛋白所需的氮源。此外,TB培养基中还含有高浓度的葡萄糖,可以提供大肠杆菌大量生长所需的碳源。
3. SOB培养基
SOB培养基与SOC培养基类似,是一种复合培养基,主要用于洗涤和培养含有质粒的大肠杆菌,以达到大肠杆菌转化和表达的效果。SOB培养基中含有高浓度的葡萄糖、海藻糖和酵母提取物等复合碳源,可以满足大肠杆菌高效生长所需的营养成分,同时还有助于维持大肠杆菌质粒的稳定性和复制。
4. 2xYT培养基
2xYT培养基是一种富含氨基酸和蛋白胨的培养基,含有较高的营养成分浓度,可以促进大肠杆菌快速生长和繁殖。与LB培养基相比,2xYT培养基中的营养成分更丰富,可以提高大肠杆菌生长的速度和效率。因此,2xYT培养基也被广泛应用于大规模重组蛋白表达和纯化领域。
5. M9培养基
M9培养基是一种最基本的人工合成无机盐基础培养基,其中不含有任何有机碳源或氮源,只有锌、铁、镁、亚硫酸盐、钠、氯离子、钾和磷酸盐等无机元素。因此,M9培养基不能直接维持大肠杆菌生长和繁殖,需要加入葡萄糖、氨基酸、核苷酸和维生素等有机营养物质。M9培养基具有非常高的可调节性和精准性,可以用于研究大肠杆菌代谢和生理机制,以及人工合成生物学的研究领域。
综上所述,除了常用的LB培养基外,还有SOC培养基、TB培养基、SOB培养基、2xYT培养基和M9培养基等多种多样的培养基可以用来培养大肠杆菌。每种培养基都有其各自的优势和适用范围,可以根据需要选择合适的培养基进行培养和研究。 在实验操作中,科技人员可以依据实验目的和研究需求,选择不同的培养基来培养和研究大肠杆菌,以获取更为准确和可靠的实验结果。
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发表于 2024-9-11 17:12 | 显示全部楼层
这个问题真的不是特意提问我的吗?之前写过的一篇文章,如下,应该会完美的回答这个问题,如果不完美,你咬我?

培养大肠用什么培养基?只知道LB你就out了
Posted on 2016-01-31 by Ryan Yu
大肠杆菌(Escherichia coliE.coli)是与我们人类关系最为密切的细菌之一,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,几乎占粪便干重的1/3。大肠杆菌同时也是生物技术领域应用最为广泛的细菌之一。大肠杆菌因遗传背景清楚、载体受体系统完备、生长迅速、培养简单、重组子稳定等优点广泛被应用于基因工程领域。很多分子生物学家都是从制备大肠杆菌感受态细胞,从大肠内提取质粒这些基础实验开始的。
培养基,细胞的食物。培养大肠杆菌最常见的培养基是什么?LB培养基,很多人可以脱口而出。那么还有没有其他的培养基能够用来培养大肠杆菌呢。事实上为了达到不同的目的(高密度,节省成本等),除了LB培养基之外,还有很多种在实验室或者工业中应用的培养基。小编将在这篇文章中总结介绍一些用来在实验室及工业中培养大肠杆菌的培养基。
LB培养基
依原则,BioEngX文章中首次出现的英文缩写一定会将英文全拼写给出的。但是LB却是个例外。很多人都知道LB培养基,但LB代表的什么意思,很多人并不清楚。LB是两个字母的首字母,这是肯定的。但是是哪两个英文单词呢。有人说是Luria Broth, 也有人说是 Lennx Broth, 还有人说是Luria Bertain的。事实上,LB最初的配方是由Giuseppe  Bertain在1951年发表的。Bertain表示LB是用来替代Lysogeny Broth这两个单词的 [1]。当然LB两个字母代替什么远没有LB的配方重要。LB培养基的配方你记得吗?不记得再看一遍。10 g 胰蛋白胨 (tryptone);5 g 酵母提取物 (yeast extract);10 g 氯化钠(sodium chloride)溶解于   1 L水中。LB培养基非常容易制备,能够允许大肠杆菌在摇瓶中,正常培养条件下(250 rpm)生长到OD600 2-3左右。
SOB(Super Optimal Broth)培养基
SOB培养基是另一种富营养培养基。与LB培养基相比,SOB培养基中含有两倍多蛋白胨,蛋白胨中富含氨基酸及多肽。另外,SOB培养基中含有镁离子,镁离子是高密度培养必须的离子。利用SOB培养基培养大肠杆菌在普通条件(250rpm)下摇瓶培养,菌浓可达到OD600 3-5左右,如果提高转速到350 rpm, OD600最高能够达到10-15。在SOB培养基中的大肠杆菌具有更高的转化效率,因此常用SOB培养基制备感受态细胞。SOB培养基的配方如下:2 % 胰蛋白胨, 0.5 % 酵母提取物, 10 mM NaCl, 2.5 mM KCl, 10 mM MgCl2 , 10 mM MgSO4注:%表示质量体积分数,2 %即 100 mL水包括2 g 固体
SOC(Super Optimal broth with Catabolite repression)培养基
SOC培养基跟SOB培养基的唯一区别是SOC中包含有20 mM葡萄糖(glucose)。培养基中的葡萄糖充当分解代谢抑制物(catabolite repressor)。大肠杆菌更倾向应用葡萄糖作为碳源。因此在葡萄糖存在的情况下,其他的碳源的分解就会被抑制。在20 mM 葡萄糖存在下,乳糖不会被代谢,乳糖操纵子被抑制,外源基因不会发生表达,这就减少了外源基因表达给细胞带来的生长压力。因此,利用SOC培养基进行转化反应时,热激后细胞生长的速率会比LB培养基中高出很多。当实验室中没有储存SOC培养基时,在LB中加入20 mM葡萄糖,效果是一样的 。SOC培养基配方如下:2 % 胰蛋白胨, 0.5 % 酵母提取物, 10 mM NaCl, 2.5 mM KCl, 10 mM MgCl2 , 10 mM MgSO4, 20 mM葡萄糖
2x YT 培养基
2x YT培养基是比LB培养基营养更为丰富的培养基。与LB培养基成分相比, 2x YT培养基中包含有更多的的酵母提取物和胰蛋白胨。因为培养基中营养更丰富了,细胞能够生长更长的时间,浓度达到更高的值。2x YT培养基主要用来进行大肠杆菌以及像是M13这样的细菌噬菌体的培养。由于大肠杆菌的浓度很高,在生产大量的噬菌体的同时,宿主仍然是存活的。2x YT培养基的配方如下:1.6 %胰蛋白胨, 1 % 酵母提取物, 0.5% NaCl
TB(Terrific Broth)培养基
TB 培养基是添加了磷酸盐的复合型培养基。跟LB培养基相比,TB培养基中除了多出20 %的胰蛋白胨和380 %的酵母提取物以外,还多了 0.4 % 的甘油作为额外的碳源。所有这些元素能够支持大肠杆菌在正常的摇瓶培养条件下生长到 OD600 5 – 8。 TB培养基通常用于实验室规模的蛋白质表达和质粒提取。TB培养基配方如下:2 % 胰蛋白胨, 2.4 % 酵母提取物, 72 mM K2HPO4, 17 mM KH2PO4,  0.4 % glycerol
SB (Super Broth)培养基
与LB培养基相比,SB培养基成分中多出了220%的胰蛋白胨和380%的酵母提取物。因此SB培养基富含超多量的胰蛋白胨和酵母提取物。据估计蛋白胨和酵母提取物中包含的主要营养元素远远超过细胞生长达到饱和时所需的量。SB培养基主要用于质粒以及蛋白质的提取。SB培养基配方如下:3.2% 胰蛋白胨,  2%酵母提取物,  0.5% NaCl
Reference:
【1】Bertani, G. (1951). Studies on lysogenesis. I. The mode of phage liberation by lysogenic Escherichia coli. J. Bacteriol. 62:293-300.
内容由BioEngX原创,转载请注明!
原文在此培养大肠用什么培养基?只知道LB你就out了 | BioEngX生化工程实验室
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发表于 2024-9-11 17:12 | 显示全部楼层
Commonly used bacterial E.coli growth media
常见的大肠杆菌培养基
LB (Luria Bertani) Miller broth (1%NaCl)LB Miller肉汤培养基: 1% peptone, 0.5% yeast extract, and 1% NaCl
LB (Luria Bertani) Lennox Broth (0.5% NaCl) Lennox肉汤培养基: 1% peptone, 0.5% yeast extract, and 0.5% NaCl
SOB medium (Super Optimal Broth): 2% peptone, 0.5% Yeast extract, 10mM NaCl, 2.5mM KCl, 10mM MgCl2 , 10mM MgSO4
SOC medium (Super Optimal broth with Catabolic repressor): SOB + 20mM glucose2x YT broth (2x Yeast extract and Tryptone): 1.6% peptone, 1% yeast extra6ct, and 0.5% NaCl
TB (Terrific Broth) medium: 1.2% peptone, 2.4% yeast extract, 72 mM K2HPO4, 17 mM KH2PO4 and 0.4% glycerol
SB (Super Broth) medium: 3.2% peptone, 2% yeast extract, and 0.5% NaCl
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发表于 2024-9-11 17:13 | 显示全部楼层
大肠杆菌在哪都能长得很快,只要有碳源、氮源和一点盐,生命力十分强悍。培养基仅仅是要求成分稳定能灭菌、透明易观察。最早是用的肉汤,性能不错,但制取实在太麻烦,含油脂还易氧化哈喇,所以就简化成了人工配制的LB。LB如此广泛使用还是因为它配制简单,成本低,实际上任何含氨基酸含碳源的东西都可以,几乎所有食物制品都能养大肠杆菌。
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