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[分享] 怎么做一个分子生物学实验室?

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发表于 2024-9-8 18:04 | 显示全部楼层 |阅读模式

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自己对细胞之类的很感兴趣,想做一个实验室需要哪些设备,?不想考研,觉得考研考上了就是帮导师做实验,不能探索自己想研究的东西,不自由,所以想自学分子生物学,然后做个实验室,做自己喜欢的实验。各位大神能给个好的建议吗?
原文地址:https://www.zhihu.com/question/66238427
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发表于 2024-9-8 18:05 | 显示全部楼层
一、干细胞实验室平面布局原则

干细胞实验室布局应符合人、物分流,洁、污分流的原则,整个实验室分为洁净区和非洁净区。
洁净区与非洁净区之间人流通过更衣缓冲系统进入物流通过传递窗传递
二、干细胞实验室的人流物流

1、人流:实验室人员通过更衣缓冲进入核心实验区,做完实验之后通过退更缓冲退出实验室。
若实验室设置阳性细胞制备间,应设置独立退出通道。
2、物流:干细胞实验室物品流分为样本流、洁净物品流、污物流。
样本在样本接收间通过传递窗进入实验区后,在样本处理间进行样本前处理。
洁净物品在物品接收间拆包后,通过自净传递窗进入实验室洁净库房存放。
实验产生的污物收集后需在灭菌室灭活后,通过传递窗传到实验室外污物暂存室暂存处理。
三、干细胞实验室平面布局

1、洁净区

(1)更衣缓冲:更衣缓冲区通常按照缓冲、一更、二更、缓冲的流程布置。
与外走廊连接的缓冲间为非洁净区,实验人员通过一更、二更、缓冲之后进入实验室洁净走廊。
一更和二更之间也可增设缓冲间,有条件的一更、二更可以区分男、女更衣。
(2)细胞制备:细胞制备区是整个干细胞实验室的核心区域,其功能包括但不限于细胞的富集、分离纯化、扩增、冻存、功能性细胞定向分化等。
细胞制备区的实验设备有生物安全柜、冷冻离心机、二氧化碳细胞培养箱、倒置荧光显微镜、普通光学显微镜、4℃医用冰箱、热合机、细胞计数仪等。
细胞制备区可根据实验室面积大小、业务量大小分为若干个细胞制备间,不同批次的干细胞不应同时在同一个的生物安全柜内制备。
(3)培养:干细胞实验室的细胞培养可在细胞制备间进行,但是会占用细胞制备间较长时间,影响细胞制备间的使用。为了避免这种情况,可在洁净区设置单独的细胞培养间,放置若干台培养箱,不同批次的干细胞不应同时在同一个培养箱内培养。
(4)制剂:制剂室也叫配液室,用于干细胞制剂的配制和灌装或分装等操作。制剂室的实验设备包括洁净工作台/生物安全柜、4℃医用冰箱等。
(5)微生物检测:微生物检测区用于干细胞成品检测,可在干细胞实验室区域外独立设置。微生物检测区的平面布局按照微生物实验室的要求设计,包含准备间、无菌室、阳性对照室及储存室、洗消室等配套设施。
(6)细胞研发实验室:该区域根据客户要求设置,用于细胞治疗产品的研发、质检。
2、非洁净区

(1)样本接收区:样本接收区宜临近电梯,方便送样人员送样。
(2)质量检测区:质检区设置免疫检测区、细胞生物学检测区、理化检测区,可用于样本检测和细胞成品的质量检测。
(3)物料存放区:存放实验所需的物品,如耗材、培养基、试剂等。
(4)细胞储存区:细胞储存区需放置若干个液氮储存罐、超低温冰箱,需要较大空间。此区域需要比较好的参观性,如果实验室设有展厅,可与展厅一同规划。
(5)辅助功能间:清洗灭菌室、污物暂存室、气瓶间、数据中心、档案室、办公室等。
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发表于 2024-9-8 18:05 | 显示全部楼层
假如题主只想做一点点小实验,比如pcr,电泳之类的,仪器试剂的钱,大概十几万到几十万的样子吧。
要想专门设置一个实验室,首先要图纸规划,报批,得到许可,不然有些试剂你都没有资格买(黑市除外)。实验室内除了实验器材,还有很多辅助设备也挺花钱的,通风,净水,灭菌等等设备。假设我们只做PCR和电泳实验,那么我们需要,
1 工作台,可以买一般大一些的桌子替代。
2 PCR仪,价格从几万到十几万都有。
3 电泳仪全套,印象中价格从几千到几万。
4 凝胶成像系统,这个贵,几十万不知道够不够。有些功能比较全的就更贵一些。
5 试剂,比如PCR相关的工作液,制作琼脂糖凝胶的琼脂糖粉,配电泳液的各种化学药品(也可以直接买现成的电泳液),核酸染料(有毒的便宜,低毒的贵)
6 净水系统,制备去离子水或者蒸馏水,也可以不要,直接买纯净水替代。
7 冰箱,普通家用即可,有rna和蛋白材料的话,还需要一个超低温冰箱或者液氮罐。
需要的东西都备好了,做啥呢?实验材料是啥,抽自己一管血,买个试剂盒,提取自己DNA,然后定制一段引物,做个PCR,送测序公司做序列测序(测序仪不会要自己配上吧,配这个对于小实验不划算),看看自己有没有突变。然后呢?
想做一点别的实验,又要从头开始买仪器设备试剂。
单纯地只喜欢做实验,那去做technician吧,只做实验。当然,也会有人管,不自由。但是好处是,仪器设备都有,肯定比自己一个人去配的全。还能和周边人切磋一下技术。
但是如果希望自己做出来的实验有科学价值,还是考研吧,导师再不济也是科研路上的领路人,科研过程是把各个实验串成一个整体来解释一个事件,没有经过系统设计的实验还是单薄的很。
如果答主能随手甩几个亿建实验室,需要请员工的话,不嫌弃的话请私信我。我就喜欢单纯搞科研,和喜欢做实验的金主肯定能一拍即合。
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发表于 2024-9-8 18:05 | 显示全部楼层
土豪你好,看你预算咯,很多实验室仪器药品有传承,小规模实验室一个月几万试剂耗材就能维持,但是从零开始就比较麻烦了,起步仪器药品轻松搞掉你几十万。按照常规仪器国产,重要仪器进口的思路来配,一台PCR几万到十万,一台普通离心机几万,一台冷冻离心机十万,DNA和蛋白电泳仪等一套几万,普通冰箱加超低温冰箱也差不多得十万,灭菌锅几万,超净台算你三万,培养箱两台五万,水浴锅一万,制冰机五万,nanodrop测蛋白核酸浓度要八万,显微镜五万。这些就是完全独立的分子生物学的最低配了,能够开展基本实验不用求人,不然你还是单干,不像在单位能借别人实验室或者公共实验室的设备。二十万块的话买齐基础的各种盐,酸,碱,醇,酚,甘油,氯仿,一套内切酶,taq与pfu,连接酶等试剂和离心管,量筒,三角瓶,pH试纸也凑合够了。当然现在连盐酸都是易制毒药品,要去公安局登记,需要你多跑几趟了。。。表达和克隆菌株这些找好心的实验室能要到,自己扩繁做感受态即可。纯水可以买屈臣氏的。
当然,你在哪儿开实验室是一个比较严肃的问题,毕竟涉及废气废水与废固的处理问题。
如果想往上搭配的话,分离纯化活性产物需要HPLC,买二手的搭配耗材就是十多万,全新的三十万起步,。买一台荧光定量PCR可能得五十万(这玩意儿耗材才是真贵),共聚焦显微镜或者电镜就是上百万了。其他流式细胞仪之类就更不谈了,总之上不封顶。这生物实验室的仪器贵起来真是让人怀疑人生。
然后是看你实验内容,研究常规非致病细菌的话还好,你这边人事儿少,一个月一万多应该够了,要是养细胞,尤其是哺乳动物细胞的话,就是无底洞了,光血清就是七千一瓶,用得省都管不了一个月,更别提培养基的其他成份也要钱了。水电费,尤其是电费其实消耗也不少。对于大部分实验室来说,维持运作的费用是最让人头痛的。
最后是思路,不知道在没有导师,不去学校读研的情况下,你会把研究的目标生物定为什么,如何查阅相关文献,选定课题目标,学会各种所需实验技术,完成既定目标,撰写文章发表或者申请专利并将技术转移给有兴趣的企事业单位。毕竟经典民科法拉第,也是在戴维实验室接受了成套培训的。
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发表于 2024-9-8 18:06 | 显示全部楼层
多的不说,科研最重要的前提条件是有钱,前期最基本的仪器试剂怎么也要百万上下,后期还要根据实验需要购买各种耗材,更别提一个实验室需要的通风,过滤,水处理设备等等改造了。如果题主的财力能够做到这些,那干嘛不自己招几个博后帮你干活?
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发表于 2024-9-8 18:06 | 显示全部楼层
我们实验室一年花费有几十万(不包括仪器)。然而我们老板并做不到完全按自己心愿来做实验,因为太穷了。。。
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