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什么是夹心 ELISA?
夹心 ELISA 是一种常用于检测和定量免疫测定中抗原的 ELISA。它是一种酶联免疫吸附测定,使用两种抗体:捕获抗体和检测抗体。在这种技术中,样品中的抗原在抗体之间结合。ELISA的目的是检测样品中靶抗原的存在。因此,在夹心ELISA的情况下,靶抗原在捕获抗体和检测抗体之间结合。在程序开始时,捕获抗体已经固定在表面上。然而,检测抗体是定量前的最后一步。夹心ELISA中的两种抗体结合到靶抗原上的不同位置。此外,捕获抗体和靶标抗体不干扰彼此的结合能力非常重要。
图1.夹心ELISA
夹心ELISA中的步骤包括用捕获抗体涂覆表面,阻断表面上未结合的蛋白质结合侧,添加含有靶抗原的样品,添加检测抗体标记的偶联物和检测。该技术的优点是其高特异性和高灵敏度。然而,其主要缺点是捕获和检测抗体之间的相互作用。
什么是竞争性 ELISA?
竞争性 ELISA 是一种常用于检测和定量免疫测定中抗体的 ELISA。这是一种也称为抑制ELISA的技术。在竞争性ELISA中,样品抗原与参比抗原竞争,与特定数量的标记抗体结合。
图2.竞争性 ELISA
将参比抗原预包被在多孔板的表面上。然后将样品抗原与添加到孔中的标记抗体一起预孵育。根据样品中抗原的量(或多或少),游离抗体可用于结合参比抗原。较弱的信号表明,当样品中存在较多的抗原时,将检测到较少的参考抗原。该技术的优点是适用于检测小抗原,适用于检测复杂样品,高特异性和高灵敏度。然而,它有一些缺点,例如需要为每个ELISA标记抗体,这可能导致抗体失活,并且随着靶抗原的增加而信号降低。
夹心 ELISA和竞争性 ELISA 有什么区别?
夹心 ELISA 通常用于检测和定量免疫测定中的抗原,而竞争性 ELISA 通常用于检测和定量免疫测定中的抗体。因此,这是夹心Elisa和竞争性Elisa之间的关键区别。此外,夹心ELISA使用两种抗体,而竞争性ELISA使用两种抗原。
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