体外诊断试剂研发学习？

wolf

知乎小菜鸟的第一次提问，希望各位前辈赐教！
我是18届刚从药学专业本科毕业，因为各种原因，现在从事体外诊断试剂的研发工作，想咨询下各位前辈关于全自动化学发光免疫诊断的研发方面，我需要从哪方面查找资料会比较好？因为我工作的公司比较小，培训基本没有，只有基本的仪器操作教学，但之后会要自己独立完成项目。。。但关于研发，我还是知其然不知其所以然，有点摸不着头绪。比如前期查找文献，知道要查什么，但不知道要怎么查，去知网之类的搜索也没有搜索到自己想要的内容，如物质的分子结构、物化性质之类的，以及行业的标准是什么。。。所以想请教下前辈，我是不是切入点不对呢？还有就是我之后如果想要在这个行业好好发展应该从哪些方面打基础会比较合适呢？

原文地址：https://www.zhihu.com/question/286672017

队长是我

大家好，今天我开始针对免疫诊断试剂的设计、开发和验证，和大家进行一个简单探讨，预计这个系列将会有四篇文章。

做这样一个比较简略的文章，是为了能够为那些研究机构和试剂开发厂商的研究人员、管理人员和质量人员提供一些验证策略和建议，以方便他们能够简单的了解新免疫诊断试剂。

虽然我在这个系列文章中提供了相关的测试和评估参数清单，但是请注意，这不是一个详尽的清单，如果要把这部分完全扩展开来，那就是一门学科，而不是几篇文章所能解决的问题，这也丧失了我们这篇文章的初心，让大家能够简单快速的了解新免疫诊断试剂。

因此，如果读者希望能够对验证方法做进一步的了解，从而确定他们的检测方法是否需要进一步的实验设计和测试的话，请前往阅读《刘博谈》系列，而不是在这个系列文章中寻找答案。

在本系列文章中，我们默认研究/质量人员可以系统地进行实验，按照一种逻辑的方式来验证一种检测方法，并不断记录验证报告所需的数据。同时我们还初步讨论了对诊断试剂有重大影响的因素，如抗体的生产和选择。好了，让我们开始吧。


想象一下，当你被告知自己被检测出患有严重的、危及生命的疾病，但几周后却发现检测结果是假的，在这个过程中，你会受到多大的压力，我有个朋友，在做CA125检测时，就被告知CA125结果异常可能患有癌症，然后哭了一天，花了快一万元进行深入检查，但被最终没有发现什么问题。

这还不是最糟糕的情况，最令人担忧的是，你对这种威胁生命的疾病检测呈阴性，但几个月后却发现你实际上患有这种疾病，而且现在已经发展到威胁生命的晚期阶段。

幸好，和检验实验室相关的法规和质量标准都要求实验室对其所采用的检验方法进行验证，确保不会出现误诊病例，无论是假阳性还是假阴性。

虽然不同的监管组织（如FDA、NMPA、CNAS、ICH、PIC/S、USP、ISO/IEC 170025）提供的验证要求的准则程度有很大差异，但总体目标始终是实现有效的分析测试结果。

使用某一方法的实验室有责任确保该方法得到充分的验证，并且如果有必要，则需要开展进一步的工作来补充现有的数据。例如，如果一个方法已经被一个标准批准组织（如AOAC国际组织）验证，用户通常只需要为他们自己使用该方法建立性能数据。



在其最通用的形式中，免疫诊断试剂是一种依赖于抗体与其目标分析物的特异性结合的分析方法。检测是通过添加信号生成成分（报告标签）来实现的，它可以对目标分析物产生反应。

免疫诊断试剂验证的目的是能够以统计学上可量化的参数来定义测定，并具有测量的信心。只有当它所针对的目标分析物，已经被明确可以用来对不同的疾病类型进行分类，并指导如何采取下一步治疗方案时，该检测方法才有资格被指定为验证的检测方法。

生物分析方法验证包括所有的程序，证明用于定量测量特定生物基质（如血液、血浆、血清、尿液、汗液或乳汁）中的分析物的特定方法对于预期用途是可靠和可重复的。

这种验证的基本参数包括但不限于：

• 准确度；
  
• 精密度；
  
• 灵敏度；
  
• 重现性；
  
• 稳定性。
  

验证过程（如图1所示）包括通过使用具体的实验室调查，证明该方法的性能特征对于预期的分析应用是合适和可靠的。分析数据是否可以被接受，取决于验证方法的标准，也就是针对其应用场景设定的要求。



图4.1|典型免疫诊断试剂的开发、验证和确认步骤示意图。开发一个检测项目通常从上面显示的检测项目开发和验证步骤开始。这些部分涉及到我们可以称之为开发检测方法的「做出选择」的部分，是定义检测参数的地方。如果该检测方法符合事先确定的分析要求，就可以进行临床前验证，以验证该检测方法是否适用于其预期的目的。这一部分涉及到「确认你做出了正确的选择」，因为它取决于之前做出的决定，如使用的校准模型和样品范围。临床验证是作为已批准的检测方法的持续验证进行的，需要检查该检测方法是否仍然具有预期的功能。

3.1 规划「节约时间要花时间」

在关于更好的战略的5P中，第一个「P」就是规划，这绝不是巧合。规划是任何项目的基础，因为适当的规划可以防止绩效不佳。

免疫诊断试剂可能涉及许多不同复杂程度的步骤和材料，所有这些部件都会给检测带来差异。因此，成功的免疫诊断试剂验证需要一个明确的总计划，以确保验证项目的一致和有效执行。

验证计划应在验证项目启动前和验证实验开始前编写。这个计划可以是一个独立的文件，也可以包含在一个适当的实验室记录中。

该文件应包括对所考虑的免疫诊断试剂的预期用途的描述和对要验证的性能参数的总结。这些参数应包括但不限于精度、准确度、定量范围、标准曲线、特异性和选择性、线性范围、重现性和稳定性。

在检测开发中节省时间的方法之一是花时间计划，啊，其实所有的事都是这样。通过回答下面列出的抗体选择问题（如表1所示），并按照计划执行，这样，研发/质量人员才有可能在减少时间的情况下达到他们的预期目标，并获得一个经过验证的检测方法。

表1|在开发免疫诊断试剂之前需要考虑的重要因素



好了，以上就是今天分享的全部内容，如果大家有什么疑问，欢迎在后台给我们留言，或者加入我们一起讨论~
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文章更新第二部分
技术｜免疫诊断试剂的开发，免疫诊断试剂的验证EP.2－－－－更新分割线－－－－
文章更新第三部分
技术｜验证前需完成的研究，免疫诊断试剂的验证EP.3－－－－更新分割线－－－－
文章更新第四部分，本系列文章已经结束
技术｜临床前验证，免疫诊断试剂的验证，EP.4

清风寡欲

2021.10.14，欧盟发布了一则IVDR修订提案，注意了，是提案，不是正式发布的修订！
只有当这个修订公布在欧盟公报上，才是确定的IVDR法规修订。在这之前，就只是一个提议。
不管如何，这个提案一出来，已引起轩然大波，厂商心里都有一丝窃喜，延期了啊，那可以晚点准备资料了，2022年5月26日过渡的压力瞬间似乎少了不少。那么真的是过渡期都会延长吗？
提案目的：
旨在解决以下两个问题：
1.公告机构能力不足的问题:目前获得IVDR审核资质的IVDR公告机构只有6家，正在申请资质的有11家，这对于欧盟市场上大约24000个需公告机构审核的器械容量而言，真的是太少，即使11家也申请到了资质，每家公告机构要审核的IVD器械是1418个器械，可想而知，对于公告机构，压力有多大。
2. 大量现有的体外诊断器械可能会从市场上消失。关于这点，在另外一篇文章中也有提及，大家可以同步参考：
IVDR新法规影响，以及是否可能延期？Medtech一项调研给您答案！请注意以下几点：
1. 拟议的修正案仅限于允许逐步实施IVDR法规要求，而不改变法规(EU) 2017/746的实质内容。
委员会建议区分较高（即 D 类和 C 类器械）和较低（即 B 类和 A 类无菌设备）风险的器械，较高风险器械的过渡期较短，而较低风险器械的过渡期较长。 这种方法旨在平衡可用的公告机构能力与高水平的公共卫生保护。
2. 受益于此次过渡期延长的器械是：需要公告机构审核的现有器械和in-house devices。
3. 拟议的修正案将不会延迟以下两类IVD器械的过渡期：
--在IVDR法规下，不需要公告机构审核的IVD器械，即IVDR下归为A类non-sterile器械，这类器械代表了大约20%的市场占比；
--“新”体外诊断器械，即没有被98/79/EC指令下签发的证书或符合性声明覆盖的IVD器械。
预计从2022年5月26日起，这两类器械需全面实施IVDR法规。
接下来我们来看下如下IVD器械的可能的过渡期延长：
1. 根据指令 98/79/EC 颁发且有效的证书的器械，可以投放市场或投入使用的时间延长1年至 2025.5.26，可以在欧盟市场上流通到2026.5.26。签发这些证书的公告机构，应继续负责对其已认证器械的所有适用要求进行适当的监督。
2. 根据98/79/EC 指令不需要公告机构审核的器械，根据98/79/EC指令在 2022 年 5 月 26 日之前为其起草了符合性声明，并且根据IVDR法规需要公告机构审核的IVD器械，可以在以下日期投放市场或投入使用：

• D 类器械：2025.5.26；
  
• C 类器械：2026.5.26；
  
• B 类器械、以无菌状态投放市场的 A 类器械：2027.5.26
  

以上器械可在欧盟市场上流通的时间分别延长1年，分别是：

• D类器械：2026.5.26
  
• C类器械：2027.5.26
  
• B类器械、以无菌状态投放市场的 A 类器械：2028.5.26
  

以上过渡期的IVD器械有两个前提条件：
1.自2022.5.26起，它们继续符合指令 98/79/EC，并且设计和预期用途没有重大变化。
2. 这些过渡期的IVD器械要符合IVDR法规关于上市后监督、市场监督、警戒、经济经营者和器械注册的要求，而不是指令 98/79 中的相应要求。

大力水手

首先对于你所研发的项目进行背景学习，知道为什么要研发它，它的临床应用有哪些，如何使用。可以查阅相关书籍，了解其临床意义，检验项目。其次查找同类品，可以从市场上或相关网站搜索说明书，标准等。再次从药监局了解分类目录，是否有相关指南，审评规范，明确注册流程，这些都属于前期调研的策划输入。在工艺开发阶段要阅读搜索大量的文献和专利来设计自己的试验，不断尝试寻找合适的原材料，供应商，不同配比得到的最佳性能参数，稳定性研究。形成相应的技术文档，继而进行批量化生产。

同花顺

一个愿意学习研发思路与相关资料的人，内心很想系统培训的人，说明是个有工作激情的可造之人。目前化学发光是IVD行业最有潜力的产品之一，本人也是从事免疫诊断产品研发，结合个人几年从业经验，试着回答你心中的疑问。

• 基础知识：由于你是药学专业，建议加强免疫分析等知识，推荐经典学习资料如下－The immunoassay handbook 4th edition、酶免疫测定技术_杨利国等编著_南京大学
  

重点掌握抗原抗体基本知识和特性、不同方法类型的原理与应用、深刻理解抗原抗体反应动力学等等。最重要的是多做实验，从实验的现象来分析原因，对相应知识的理解会更深刻，解决实际问题的效率也更高。
IVD基础：楼上所说的小桔灯，是专业服务于体外诊断的网站，有技术注册、行业资讯等信息，有医疗法规、行业标准、注册指导原则等可下载。
2. 打好研发基础，了解产品开发流程，然后有针对性的去学习，合理安排研发进度，在预定时间拿到注册证。大致流程如下：
A. 立项调研：现状，方法学选择等；
B. 原料筛选：先检测限、线性范围、可报告范围，再精密度、准确度、干扰实验评估等；
C. 工艺优化：包被标记工艺、配方体系、反应体系等；
D. 反应模式筛选;
E. 全性能测试：参考CLSI EP文件，主要是评估准确度（方法学比较）和参考值区间等
F. 稳定性研究；
G. 产品注册;
3.  查资料方面。化学发光产品开发，目前国内与罗氏、雅培、贝克曼、西门子医疗四家仍然差距不小，国内公开的资料能获得的信息有限，尽量去学习四大家的专利、产品说明书及相关资料(官网、检验科或同行)等，多参加一些行业内的交流。
如果自己不开发原料，如物质的分子结构、物化性质之类的，找一篇项目相关的硕博论文或说明书，里面的信息估计足够。体外诊断试剂立项调研关注可行性分析，如市场需求、成本、技术等，研发方面标志物的临床意义、方法学选择、性能要求、物化特性、注册要求等。

继续前进

我是去年毕业的，但是今年才接触体外诊断行业。我现在是做IVD原料的市场推广。
一开始，也是摸不着头脑，因为我们刚开始这个新项目，也没有有经验的人，大都是自己摸索学习的。在网上搜各种和体外诊断相关的文章，学习。我们先开始了CRP抗体项目，那么我就先在网上找和CRP相关的资料，楼主是要做研发的，那就要多看文献，不要仅限于知网（知网里的硕博毕业论文多看看），谷歌学术也搜看看。在和有经验的人交流后，又了解到抗原原料可以用来做质控品、校准品、标准品等，然后又在网上查相关概念，有什么标准等；在qq/微信群，听到有人讲抗体原料，然后又查找抗体有哪些标准，怎么评估一个抗体（比如它的特异性、灵敏度、线性范围、CV等）。
我看楼主是药学毕业的，不知道对于免疫学的基础知识是否扎实？因为我是生物学毕业的，在公司也学习了大半年的免疫相关的知识，建议楼主先从基础入手。然后，对需要做的项目的临床意义要清楚，应用要的抗体性能要了解，再筛选合适的抗体，评估相关性能（有相关指导性原则），并且结合化学发光相关文献进行消化，学习。不要着急，体外诊断行业要学习的内容不是一时半刻就懂的。
研发是需要动手去做的，试剂盒研发的没一步骤都很重要，从抗体的筛选，工艺的优化（缓冲液，ph，防腐剂，包被量，标记比例等）等。开始去做，就会发现慢慢的你就懂了。
总之，我的学习经历可以总结为1. 和同行交流 2. 多看文献 3. 多思考 。因为，我差不多算是自学的，了解的有限。只能和楼主分享这些。共勉！
推荐几个IVD相关论坛：丁香园，小桔灯，蒲公英，SFDAIED论坛等。