细胞培养遇到污染的可能原因汇总

生物科研实验室

我们都知道细胞培养污染是实验室常见的问题，可以由细菌、真菌、酵母、支原体或交叉污染的其他细胞系引起。根据提问描述的情况，通常表明是细菌性污染。加入双抗可能会暂时抑制部分非耐药细菌的生长，但如果污染严重，抗生素是无法完全清除污染的。



而对于重新更换培养液、血清和PBS，并且对超净台和培养箱进行消毒，但污染又一次出现，可能的原因包括：

1.消毒不彻底：超净台和培养箱可能未能彻底消毒，仍然有污染源残留。

2.个人操作问题：操作过程中可能存在无菌技术的疏忽，例如手部消毒不彻底。

3.实验材料被污染：同一批次的库存实验材料可能已被污染，又或者该批次实验材料在生产、运输或存储过程中被污染。

4.其他污染源：实验室的其他设备、容器或试剂可能存在污染，如移液器、冰箱、水浴等。

5.其他实验人员引入污染：实验室内人员流动过大导至空气流动带来污染，或其他人员在实验后未进行彻底消毒。

6.耐药细菌：可能存在对双抗耐药的细菌株，这种情况下即使加入抗生素也无法防止污染。



为了避免细胞污染问题，可以采取以下措施：

1.正确穿戴：进入无菌操作区前，应当正确穿戴好实验服、手套、口罩等防护装备，同时避免佩戴手表和首饰。

2.正确使用超净台：实验前用70%乙醇擦拭超净台工作区和放入超净台的物品，实验时应保持工作区域干净整洁，实验后应进行彻底消毒。

3.定期清洁实验室环境和设备，如培养箱、水浴。

4.尽量减少细胞暴露在非无菌的环境中：例如尽量减少在显微镜下观察细胞的时间，用70%乙醇消毒后尽快放回超净台或培养箱中。

5.定期在显微镜下检查细胞状态，观察是否存在细菌、细胞形态变化或异常增殖率。

6.使用无菌试剂和无菌用具。

7.正确处理污染的样品：如细胞样品确定已被污染，请在水槽或远离培养箱的地方，在污染的细胞样品中加入10%的漂白剂或含氯消毒液，然后丢弃培养容器。同时需要告知在同一培养箱中有样本的其他人员，如其他人员的细胞也存在污染，应尽快清空和消毒培养箱。