嗅球切除(olfactory bulbectomy,OBX)模型是较早建立并应用于抑郁症研究的动物模型,OBX后动物表现出空场活性增加、强迫游泳和悬尾不动时间增加和糖水偏爱下降等行为学特征。 一、实验动物
♂SD大鼠,体质量100~140g,实验前在安静的环境下适应性饲养2周,自由进食、饮水,自然昼夜节律光照。 二、方法
采用探针捣毁嗅球与负压吸引相结合的方式切除嗅球制作大鼠嗅球切除抑郁症动物模型。 三、模型的建立
大鼠在手术前1周内,每日1~2次抚摸,至手术时大鼠体质量为260~300g,2.75%戊巴比妥钠(55mg·kg-1,2ml·kg-1,ip)麻醉大鼠,在两耳联线中点处将皮肤切开,暴露颅骨,在距前囟前7~8mm,与正中缝两侧旁开2mm的交点处,用电动磨钻将颅骨钻两个直径2mm的小孔,用9号不锈钢注射器针头,针头斜面弯成约150°的角度并磨成钝圆形,手术时用针头斜面的背侧从各个方向捣毁嗅球,能够看到白色的脑组织从颅骨钻孔处涌出,用真空泵将破坏的嗅球组织吸出,吸收性明胶海绵填入小孔止血。但负压吸引的时间不要太长(约3~5s),以免引起大鼠失血过多影响术后恢复。缝合后连续3天肌肉注射并肌注青霉素钠4万U/只,以防止术后感染。
术后有条件实验室的可以单笼饲养,以避免或减少OBX大鼠之间的攻击性。每天对大鼠抚摸,消除其他因素引起的攻击性,称重,恢复2周。
实验结束后,解剖大脑,嗅球残留大于30%或前额叶皮层受到损伤的动物数据被排除。
注意事项 应用此方法制作嗅球切除模型,每只大鼠的手术操作时间在10min之内,嗅球的切除程度都在2/3以上,而且术后存活率高达90%以上。
|