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发表于 2024-5-29 11:43
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细胞培养中,加药是常见实验,细胞过稀或过密加药会影响实验结果的准确性,那么细胞培养密度多少,加药合适呢?今天一起讨论下。
低细胞密度:
✱增殖受限:在稀疏条件下,由于细胞间相互作用的减少,关键的生长因子和信号分子的浓度可能下降,从而抑制细胞的正常生长和分裂。
✱应激反应:缺乏邻近细胞的接触可能诱导细胞应激,增加细胞死亡或异常分化的风险。
✱影响细胞行为:在某些细胞类型中,密度过低可能会干扰细胞极性的形成和迁移能力。
高细胞密度:
✱生长停滞:细胞间的紧密接触可能激活接触抑制,导至生长停滞。
✱资源竞争:细胞过多会导至营养物质和氧气的供应不足,引发激烈的资源竞争。
✱废物累积:代谢废物(如氨和乳酸)的积累可能对细胞产生毒性作用。
✱异质性问题:高密度可能加剧细胞行为的异质性,影响实验结果的一致性。
细胞传代的最佳时机?
❆对于大多数细胞类型,理想的传代密度是在细胞即将达到但尚未完全达到接触抑制时,通常相当于70%到90%的覆盖率。
❆快速增殖的细胞可能需要在更低的密度(60%到70%)下传代,以避免过早出现接触抑制。
❆生长缓慢的细胞可以在稍高的密度(80%到90%)下传代,以保持足够的细胞数量。
给药实验中的细胞密度选择?
选择适当的细胞密度对确保药物处理期间细胞健康生长至关重要,同时需避免接触抑制的发生。
开始给药时,细胞密度一般控制在50%到70%之间,为细胞提供足够的空间以响应药物作用。
对于长期药物处理,建议从更低的密度开始,以防止实验结束时细胞过度拥挤。
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