博莱霉素致大鼠间质性肺病模型的构建

科研CRO

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肺间质纤维化（pumlonary interstitial fibrosis）是一种慢性炎症间质性肺病，以肺泡巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞在末端肺泡聚集，实质细胞损伤、肺泡纤维化为特征。其病因及发病机理尚不清楚，5年生存率不超过50％，目前尚无特效的治疗方法。因此进一步研究其发病机制、寻找有效的治疗方法，已成为许多国内外研究的热点。

1、实验动物

Wistar大鼠，雄性，6-8周龄，体重（200±20）g

2、造模方法

雄性Wistar大鼠用10%水合氯醛，4ml/Kg体质量腹腔内注射。待大鼠麻醉后，将其仰卧位固定在鼠板上，头低位暴露声门，水平插入16号静脉套管针，到达咽喉部时，压低针尾，插入气管，拔出针芯。大鼠经气管内一次性灌注博莱霉素药液5mg/kg。注入后立即将大鼠直立旋转，以便于液体均匀在肺内散布，制成间质性肺病模型。动物清醒后随意进食，观察28天。

3、观察指标及检测方法

1、大鼠一般情况观察

每天观察大鼠的活动度、对外界反应的灵敏度、大鼠的皮毛光泽、口唇鼻颜色、体重、饮食、呼吸、死伤等情况。

2、病理学观察

大鼠用10%水合氯醛溶液（4ml/kg）进行麻醉后，取新鲜右肺下叶组织200g，用PBS缓冲液对肺组织周围的血液等污物进行冲洗，经10%中性福尔马林48小时充分固定后，再通过梯度酒精进行脱水，再通过二甲苯进行透明，石蜡包埋，间断4μm切片4张，常规HE染色，光镜下观察肺组织。