细胞贴壁不均匀的原因

生物科研实验室

在培养贴壁细胞的时候，偶尔会出现细胞接种后贴壁不均匀的情况。有的地方长得非常密集，有的地方却太稀疏。虽然这对于常规培养并不算大问题，但有时则可能影响后续的实验进程。
所以一旦遇到贴壁不匀，建议排查原因并优化操作方案。

本文中将细胞贴壁不均匀总结归纳为四种情况：


局部生长密集，密集处呈不规则分布



原因：一般是接种时没有混匀，或者细胞传代时没有消化彻底从而形成细胞团块导至的

解决方案：继续培养1-2天，待细胞状态稳定后，重新消化接种，接种时注意使用十字法或8字法混匀，接种后显微镜下确认细胞是否分散为单个细胞。
培养器皿中央生长密集，边缘稀疏



原因：十字法或8字法混匀时摇晃次数过多，液体形成漩涡所导至

解决方案：继续培养1-2天，待细胞状态稳定后，重新消化接种。在混匀时摇晃5-6次即可。
细胞在培养器皿的半边生长，形成明显分界线



原因： 这可能是培养箱架子不平造成的

解决方案：可通过调节培养箱架子以保持水平解决。

细胞形成同心圆，并靠边缘生长
原因：这是由于培养箱风扇故障或设备震动导至

解决方案：在培养器皿下面垫泡沫板或在架子上放重物可以有所缓解，检查培养箱风扇是否正常运转。


总之，细胞贴壁不均匀可能是多种因素造成的，对于前两种情况，一般是传代操作造成的，重新接种即可解决；而后两种情况是硬件设施造成的，则需要调试设备。