实验中石蜡切片与冰冻切片区别

生物科研实验室

在组织学中，石蜡切片和冰冻切片都是常用的方法，前者常用于进行免疫组化实验，后者则常用于免疫荧光实验。

组织学常规制片技术中最为广泛应用的切片方法，为石蜡切片与冷冻切片。石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤，为永久性显微玻片标本。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法。多应用于手术中的快速病理诊断。而且也被用于其他许多学科领域的研究中。

冷冻切片技术，是一种在低温条件下使组织快速冷冻到一定的硬度，然后进行切片的一种方法。被称为病理科的急诊工作----在外科手术过程中，医生切取部分肿瘤组织或其它病变标本，送检到病理科通过快速冷冻标本制作切片，病理科诊断医师对该切片进行观察快速做出判断得出良、恶性结果或某种疾病的诊断。

冷冻切片与常规石蜡切片区别下面小结：

1、制作方式不同：

①、冷冻切片要求送检新鲜组织，采用低温恒冷切片机，将取材组织置于-25℃冷冻箱内速冻3-5分钟，切8微米厚度切片，固定后水洗直接染色，针对不同组织采用不同温度进行切片。

②、石蜡切片--送检组织用10%中性福尔马林固定，标准取材后，置入全自动脱水机进行脱水、透明、浸蜡，再进行包埋、切片，厚度3-5微米，将切片烤片后，置入全自动染色机进行染色。

2、镜下观察不同：

①、冷冻切片---因为冷冻组织未经过固定是新鲜组织冷冻切片，没有经过充分的脱水，对组织的观察会有一定的影响，所以切片镜下细胞、组织略显肿胀，诊断准确率95%以上。

②、石蜡切片---因为组织块经过10%中性福尔马林固定，酒精梯度脱水、二甲苯透明、石蜡包埋，所以切片平整、颜色鲜艳、细胞组织结构清晰可见，诊断准确率99%以上。

3、用途不同：

①、冷冻切片用于术中病理诊断，达到迅速做出诊断，包括良、恶性、切缘及淋巴结转移情况。所以要求病理诊断医师具有高年资病理诊断经验，取材部位精准， 病理技术人员具有冰冻切片的经验。

②、石蜡切片用于术后病理诊断，要求离体组织及时固定，保持组织原有结构及成分固定在原有位置，经过一系列技术处理，通过这些处理可以使得切片在显微镜下清晰的辨认其形态结构，组织细胞形态结构保存良好，可以帮助医生更加准确的做出诊断。



由于冷冻切片存在质量和时间上的限制，冷冻切片病理诊断对肿瘤的分型不一定非常准确，对部分无法确定组织学类型的病/例，还需要等待常规的石蜡切片予以确诊。冷冻切片较石蜡切片制作厚，做出来的切片没有石蜡切片清晰。

总之，简单概括起来，两者之间最大区别是冰冻切片操作便捷性高，能很好保持抗原活性、脂肪、类脂成分。石蜡切片组织形态好，能切更大组织，切片厚度薄，连片性好，对标本的长期保存非常适合。