干货分享 | 如何判断qPCR数据能不能用？

科研顾问

大家好，今天聊下做的aPCR数据可以进行分析，能不能用这个问题，判断 qPCR 数据是否可用需要考虑以下几个方面：

扩增曲线：扩增曲线应该呈现出典型的 S 型曲线，且曲线应该平滑，没有明显的锯齿状或平台期。

阈值线：阈值(threshold)一般是基线的标准偏差的10倍。阈值线应该位于扩增曲线的指数增长期，且应该在曲线的中部，不应过高或过低。

CT 值：CT 值(循环阈值)是指扩增曲线达到阈值线所需的循环数。CT 值应该在合理的范围内，一般来说，CT 值应该在 15-35 之间。

内参基因：如果实验中使用了内参基因，内参基因的 CT 值应该稳定且在合理范围内。

重复性：qPCR 实验应该具有良好的重复性，即相同条件下重复实验得到的结果应该相似。

溶解曲线：单峰无杂峰，TM在75-90之间。

如果 qPCR 数据满足以上要求，则可以认为数据可用。如果数据存在异常或不符合要求，则需要进一步分析原因并采取相应的措施，如优化实验条件、重新实验等。