二甲苯,化学式为C8H10,二甲苯或二甲苯芳族烃混合物,组成的苯环在不同位置两个甲基基团,二甲苯是由甲苯和苯的甲基化而被生产。2017年10月27日,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考,二甲苯在3类致癌物清单中。 一、致癌性
1982年,世卫组织旗下的国际癌症研究机构(IARC)曾经发表过有关苯和相关化合物致癌性的专论,到1988年又补充了部分流行病学和实验证据,得出结论认为:
苯,属于人类1类致癌物,有充分的证据表明苯对人有致癌作用,主要是可导至造血系统的癌症;甲苯和二甲苯,被归类于人类三类致癌物,即没有证据证明对人类有致癌作用;尽管有证据表明实验动物体内高浓度的甲苯和二甲苯具有致癌性。 二、二甲苯在石蜡切片中的应用
石蜡切片制作步骤 1.取材 打开动物腹腔,剪取肝组织,切取的组织块不宜太大,以利于固定剂穿透。 2.固定 将切好的肝组织用生理盐水清洗,立即投入中性福尔马林固定液中固定30-50min。
3.洗涤
材料经固定后,流水冲洗,数小时或过夜。
4.脱水
材料依次经70%、80%、90%各级乙醇溶液脱水,各30min,再放入95%、100%各2次,每次20min。
5.透明
纯酒精、二甲苯等量混合液15min,二甲苯Ⅰ15min、Ⅱ15min至透明为止。
由于乙醇与石蜡不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡,所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。当组织中全部被二甲苯占有时,光线可以透过,组织呈现出不同程度的透明状态。
6.透蜡
放入二甲苯和石蜡各半的混合液15min,再放入石蜡Ⅰ、石蜡Ⅱ透蜡各50-60分钟。
7.包埋
8.切片
9.展片、贴片
10.脱蜡复水
将水浴锅温度调至60℃,待水温控制在60℃时,将切片连同切片架放入一干燥的染色缸内,放入水浴锅中,盖上盖子(可密封),30min至蜡熔化。之后,石蜡切片经二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各5min,然后放入100%、95%、90%、80%、70%各级酒精溶液中各3-5min,再放入蒸馏水中3min。
11.染色
切片放入苏木精中染色约10-30min。
12.水洗
用自来水流水冲洗约15min。使切片颜色变蓝。
13.分化
将切片放入1%盐酸乙醇液中褪色,约2秒至数十秒钟。见切片变红,颜色较浅即可。
14.漂洗
切片再放入自来水流水中使其恢复蓝色。
15.脱水Ⅰ
切片入50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇中各3-5min。
16.复染
用0.5%伊红乙醇液对比染色1-3min。
17.脱水Ⅱ
将切片放入95%乙醇中洗去多余的红色,然后放入无水乙醇中3-5min,用吸水纸吸干多余的乙醇。
18.透明
切片放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各3-5min。
19.封藏:中性树胶封存
可以看出二甲苯作为透明剂,能同时与脱水剂(酒精)和石蜡混合,取代了脱水剂后,石蜡便能顺利地渗入组织,使组织各部分被二甲苯填充。染色后还要用二甲苯处理是增加组织的透明度,让切片看的更清晰,结构更清楚。
三、实验室防护
可以通过以下几种途径减少苯的暴露: 1. 加强通风:在使用二甲苯的场所,应该保持良好的通风条件,可以通过开窗、使用空气净化器等方式实现。 2. 佩戴呼吸防护装备:当需要长时间接触二甲苯时,应该佩戴适当的呼吸防护装备,如防毒面具等。
3. 使用安全的工具和设备:在二甲苯相关工作场所,应该使用安全的工具和设备,避免暴露于苯中。
4. 定期体检:定期进行体检,及早发现和治疗可能存在的白血病等疾病。
5. 使用更加健康环保的实验试剂。
总的来说,苯是引起白血病的重要环境因素,二甲苯的血液系统毒性较小,不一定是白血病的致病因素,但是工业二甲苯含有一定量的苯,所以为了减少潜在的暴露风险,建议在接触二甲苯溶液时也要严格做好防护措施,才能更好地减少伤害。
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