干货分享 | PAS染色

生物科研实验室

一、简介


PAS（Periodic Acid-Schiff stain）染色又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质，还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。其原理是过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。

二、染色流程


1. 切片常规脱蜡至水；



2. 蒸馏水洗1-2min；



3. 高碘酸溶液氧化10min；



4. 蒸馏水洗，甩去多余水分；



5. 雪夫（schiff）试剂染色10-15min；



6. 流水冲洗，甩去多余水分；



7. 苏木素染液染核2-4min；



8. 流水冲洗反蓝3-5min，甩干多余水分；



9. 常规脱水透明，中性树胶封固。

三、染色结果


霉菌、糖原、中性粘液物质呈红色，胞核呈蓝色。

四、注意事项


1. 苏木素染液建议常温放置，染色更加；



2. 雪夫试剂临用前半小时取出恢复室温，未染色试剂出现淡红色不能使用；



3. 如试剂盒储存在2-8°C环境下，染色过程中试剂出现淡红色属于正常现象；



4. 雪夫试剂染色时间随室温而定，夏季室温高，作用10min即可，冬季室温低，则可延长至20min，雪夫试剂染色要避光；



5. 操作时做好防护，避免溅眼；



6.超过有效期不可使用。

五、 临床应用


随着医学实验技术的发展，糖原染色应用的范围更加广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质 ，心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ，糖原累积病诊断和研究 ，糖尿病的诊断和研究 ，用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外 ，还可以观察肾小球基底膜 、结肠杯状细胞 中性黏液物质 、阿米巴滋养体和霉菌的着色，为临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据。