旋转大鼠模型

生物科研实验室

2023年8月，国自然立项名单即将公布。



而往年的面上与青基项目中，成功获批的“青椒”的年龄几何，又是何职务呢？



青塔统计了近3年面上项目的项目负责人年龄与组成人员分布、青年科学基金项目的项目负责人的职务及学历分布情况，带大家一探究竟。



面上项目负责人统计

简介

Parkinson 病模型的构建是利用神经毒剂 6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）破坏黑质的多巴胺神经元，6-羟多巴胺是多巴胺的羟基化衍生物，其化学结构与多巴胺 DA 类似，因此能够同 DA 竞争摄取位点，当 6-羟多巴胺被摄入细胞内能够被氧化分解产生活性氧及氧自由基，或直接引起线粒体功能障碍，导至神经元死亡造成 Parkinson 病模型。

用途

用于帕金森病病理机制和治疗方法的研究。



参考：

Blum D , Torch S , Lambeng N ,et al. Molecular pathways involved in the neurotoxicity of 6-OHDA, dopamine and MPTP: contribution to the apoptotic theory in Parkinson's disease[J].Progress in Neurobiology: An International Review Journal, 2001(2):65.

材料与仪器

器材：

① 常用手术器械；

② 缝合线；

③ 立体定向仪；

④ 微量注射器。

试剂：

① 6-羟基多巴胺；

② 维生素 C；

③ 生理盐水；

④ 阿扑吗啡。

步骤

1、大鼠适应培养一段时间后，麻醉后固定于脑立体定向仪。

2、剪开头皮后用棉签轻轻擦拭颅骨表面，将前囟（bregma）和后囟（lambda）点暴露出来，并确定黑质坐标：前囟后 4.4mm，中线旁开 1.1mm，硬膜下 7.5mm。

3、以微量注射器向上述坐标点注入 6-羟基多巴胺 10μg（溶于 5μL 含 0.2mg/mL 维生素 C 的生理盐水中，用前临时配制），注药速度 0.5μL/min, 注药后留针 1~5 分钟。

4、缝合伤口后抗感染治疗 3 天。

5、两周后大鼠皮下注射阿扑吗啡 0.25mg/kg，诱发大鼠旋转，3~5 分钟动物出现旋转，确定 40 分钟总的旋转次数及力向，以后每周观察一次。

6、确定旋转鼠模型成功的标准：连续两周测试平均转速 >7 次/分，持续旋转 >40 分钟。

注意事项

1. 黑质靶点的确定，应根据所用的定向图谱及立体定向仪认真调整验证。

2. 选用 Wistar 大鼠的体重为 150~160g。

3. 6-羟基多巴胺应新鲜配制，注意避光，颜色以橙红色为准。

4. 注药速度与留针也很重要。

5. 由于 6-OHDA 不能穿透血脑屏障，因此在使用 6-OHDA 进行帕金森造模时，需要直接注射入动物脑内，才能损伤中枢神经元。