糖原染色法，显微镜下的桃花源！

宋宋030688

PAS染色全称为过碘酸雪夫氏染色（schiff periodic acid shiff, PAS），又称糖原染色。一般用来显示糖原和其它多糖物质。

染色原理

细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质（如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等），过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基，其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色，沉积在细胞内多糖所在之处。

染色步骤

• 组织石蜡包埋切片后脱蜡至水，蒸馏水洗2min（细胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗）；
• 滴加过碘酸溶液，氧化5min；
• 蒸馏水洗10min；
• 滴加Schiff试剂，侵染10-20min；
• 倾去Schiff 试剂，流水冲洗10min；
• 滴加苏木素染色液，染核1-2min；
• 流水冲洗5min；
• 酸性乙醇分化液分化；
• Scott反蓝水洗3min；
• 常规透明、封片。
  

染色结果

PAS染色结果

糖原、多糖类物质及其他PAS反应阳性物质呈紫红色，细胞核呈蓝色。

注意事项

• 高碘酸溶液为透明溶液，配制后放4度冰箱备用，无法从常规的颜色辨别高碘酸的好坏，需要定期更换；
• 染色试剂均应低温保存，临用前半小时取出恢复室温；
• Schiff染液染色时间可随温度调整，室温高可减少染色时间，冬季室温低，可延长至20 min左右。