[交流] 行为学实验 | 大小鼠抑郁模型评价方法

与光同辉

一、强迫游泳实验(forced swim test)
1、实验方法

(1) 实验前调节测试箱内水温，水温应为23～25℃。水深应根据动物体重进行调整，动物尾巴与测试箱底面保持一定距离。

(2) 如同时进行多只动物实验，每两只动物间应用不透明挡板隔开。

(3) 大鼠强迫游泳实验，应在实验前1d预游，24h后进行强迫游泳实验。记录5min内动物的不动时间、游泳时间及攀爬时间。

(4) 小鼠强迫游泳实验，应在检测当天进行，小鼠游泳时间应为6min，记录后4min的游泳时间、不动时间及攀爬时间。

2、评价指标

评价指标应采用动物不动、攀爬、游泳三类动作的时间及次数进行判定。

(1) 不动(immobility)：动物在水中停止挣扎，呈漂浮状态，仅有轻微的肢体运动以保持头部浮在水面。不动时间越长表明抑郁程度越重。正常小鼠不动时间在检测时间的40%～80%内；正常大鼠不动时间在检测时间的30%～70%内；抑郁行为判断标准：不动时间与对照组相比显著性增加(P＜0.05) 。

(2) 游泳(swimming)：动物进行流畅、协调的运动，动物四肢始终在水面以下。游泳时间和游泳距离越少，表明抑郁程度越重。

(3) 攀爬(climbing)：动物四肢强有力伸出水面，并沿测试箱壁做剧烈的上下动作。5min检测期内，SD大鼠攀爬时间60～130s。攀爬时间越少，表明动物抑郁程度越重。
二、悬尾实验(tail suspension test)
1、实验方法

悬尾实验多采用小鼠，其操作方法如下：

(1) 实验开始前，动物尾部悬吊使小鼠呈倒悬体位，头部应与悬尾箱底面保持一定距离。

(2) 如同时进行多只动物实验时，每两只动物间应用不透明挡板隔开。

(3) 记录检测期动物的不动时间。

(4) 实验时间应为6min，记录后4min内动物的不动时间。

2、评价指标

用不动、运动挣扎二类动作行为的时间进行判定。

(1) 不动：动物停止挣扎，身体保持垂直倒悬状态，静止不动。动物的在悬尾实验中的不动时间越长表明抑郁程度越重。空白对照组c57小鼠不动时间较长，均值多大于100s；空白对照组ICR小鼠不动时间均值多小于 100s；抑郁行为判断标准：不动时间与对照组相比有显著性增加(P＜0.05) 。

(2) 运动挣扎：动物有明显可见的挣扎运动。运动挣扎时间越短，表明抑郁程度越重。
三、糖水偏爱实验(sucrose preference test)
1、实验方法

大、小鼠糖水偏爱实验的操作方法上略有不同，对其分别进行总结如下：

(1) 大鼠糖水偏爱实验：训练期：动物应单笼饲养，进行48h的蔗糖饮水训练。前24h给予两瓶1%～2%蔗糖水，后24h，一瓶给予1%～2%蔗糖水，另一瓶给予饮用纯水(中途交换两个水瓶位置) 。大鼠禁食禁水14～ 23h 后，进行糖水偏爱指数的测定：测定1h内大鼠对两瓶水的饮用量(g) 。

(2) 小鼠糖水偏爱实验：操作流程同大鼠。但在48h饮水训练时，应全程给予1%～2%蔗糖

水和饮用水(中途交换两个水瓶位置)。训练期结束后，禁水(不禁食)9～16h，测定8～15h内(中间宜交换两瓶位置1次)小鼠对两瓶水的饮用量(g) 。

2、评价指标

应采用蔗糖偏嗜度(sucrose preference) 作为评价指标，蔗糖偏嗜度(%)=蔗糖水饮用量/(蔗糖水饮用量+饮用水饮用量)×100%。

抑郁行为判断标准：蔗糖偏嗜度低于0.4或者与对照组相比有显著性减低(P＜0.05)。