动物模型|慢性难愈合创面模型构建

与光同辉

慢性难愈合创面是指因多种外界或内在因素引起经治疗1个月以上愈合进展缓慢或仍未愈合的创面，主要包括创伤性溃疡、糖尿病溃疡、压疮、动静脉溃疡、癌性溃疡及感染性溃疡等。该疾病由于多种复杂的内外因素综合作用，致使创面存在持续的感染及慢性炎症而迁延难愈，所以在实验中动物模型应体现这一特点。

动物的选择
兔、狗、猪、鼠是较常用的模型动物。通常选用SD大鼠或 Wistar大鼠制作溃疡创面模型。中国地鼠经培育症状体征及体内生化水平都类似于II型糖尿病，可作为糖尿病疮疡动物模型的最佳选择。在性别方面，因雌性大鼠的生理周期特性及妊娠可能使实验受到干扰，一般选择雄性大鼠或雌雄各半。

造模方法

一
创伤性溃疡模型
常用皮肤切除+激素法。



造模方法



大鼠适应性喂养1周，麻醉后，在正中偏上的背部做一个直径2cm(可选择硬币或瓶盖) 标识，常规备皮并无菌消毒，切开标记处的全层皮肤至筋膜层，最后肌内注射一定量的醋酸氢化可的松。



优缺点



因其较易操作，所以实验常用此方法，但缺乏一个可靠的成功检测标准。感染是慢性创面的普遍特征，慢性创面中病原菌检测阳性率达81.03%，主要为大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌，然而在实验中普遍未应用病原菌的检测标准，因而很难推测模型创面是否与临床上难愈合创面一致。




二
糖尿病溃疡模型
采用链脲佐菌素(STZ)诱导至糖尿病模型+全层皮肤缺损法。先用链脲佐菌素(STZ)对胰岛素造成不同程度的破坏，使胰岛素分泌相对不足或绝对不足而建立糖尿病模型。



造模方法



SPF级Wistar大鼠高糖高脂饲料喂养1周后，禁食12h，腹腔注射STZ(60mg/kg)，3d后每天测定大鼠的血糖，采用尾部静脉血测定，7d后若大鼠的非空腹血糖大于16.7mmol/L即可认为糖尿病模型制作成功；再制作创面：大鼠麻醉后，在正中偏上的背部两侧各做一个直径2cm的圆形标记，备皮及消毒，手术剪切开皮肤深达筋膜层，造成皮肤缺损创面；最后在造模区接种金黄色葡萄球菌。一般菌的数量是106/g组织。



注意事项



1、在此造模的过程中应该注意创面最好选择背部，面积约为2cm×2cm大小，以免过大超过大鼠耐受范围；血糖至少 16.7mmol/L以上，过低不符合糖尿病体征，过高易致大鼠死亡。

2、STZ具有对组织毒性小、动物存活率高等特点，广泛应用于构建糖尿病模型。

3、此模型能体现出临床糖尿病难愈合创面体征，但具体流程繁琐，操作较难，且整体造模成本高。




三
压疮模型
压疮即褥疮，常发生于老年、瘫痪致使长期卧床的患者中，骨隆突是疾病多发部位。其中缺血-再灌注压疮造模方法最符合临床发病机制及疾病特征。



造模方法



大鼠麻醉后，于后肢背侧备皮，将大鼠置于木板，呈仰卧位固定四肢，使压强为30kPa的磁铁或压力装置施压于双侧后肢膝关节小腿骨隆突处局部皮肤。该模型制作采用缺血-再灌注损伤原理，每个循环中，包括2h的缺血期和30min的再灌注期，3个循环/d，连续 2d。当受压部位出现红、肿、热等炎症反应，继发有红斑、水泡、溃疡时可认为造模成功。



优点



此方法符合临床压疮发生实际情况，可操作性强，成本不高。



用途



此模型用于动物压疮实验参考。




四
感染性溃疡



感染是造成创面迁延难愈的重要因素，常用皮损法+涂菌法。



造模方法



大鼠麻醉后，在大鼠的背部脊椎两侧各做一个直径2cm的圆形标记，切开全层皮肤并深达筋膜层，创面充分止血后种植一定浓度的大肠杆菌或金黄色葡萄球菌，3d后创面附有脓性分泌物，渗液较多，皮缘红肿，皮温升高，即可认为造模成功。



优点



制作方法简单，成本低，成功率较高。



用途



应用于感染性创面的实验研究。
结论
慢性创面基础实验研究中，因不同慢性疾病导至的创面不同，造模方法各异，标准难统一。由于人与动物的皮肤结构和生理特性存在显著差异，难以复制出完全与人类创面一致的动物模型，需要研究者们继续摸索。