【实操技巧】Masson三色染色法

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asson三色染色法是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维，又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

Masson三色染色法步骤

• 切片常规脱蜡至水；
• 用配制好的Weigert 铁苏木素染色液染色5 min-10 min；
• 充分水洗，如过染可盐酸酒精分化；
• Masson蓝化液返蓝3-5 min，水洗；
• 蒸馏水洗1 min；
• 丽春红品红染色液染色5-10 min；
• 在上述操作过程中按蒸馏水：弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液，用弱酸工作液洗1 min；
• 1%磷钼酸溶液洗1-2 min；
• 用配置好的弱酸工作液洗1 min；
• 不经水洗直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2 min；
• 用配置好的弱酸工作液洗1 min；
• 95%乙醇快速脱水；
• 无水乙醇脱水3次，每次5-10 s；
• 二甲苯透明3次，每次1-2 min；
• 中性树胶封固。
  

Masson三色染色法结果

Masson 染色后肌纤维、胞浆、肌肉呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，胞核呈黑蓝色

注意事项

• 切片脱蜡应尽量干净。
• 组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液可延长或缩短染色时间。
• 酸性乙醇分化时间应该依据切片薄厚，组织的类别和新旧而定。
• 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配置 0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。
• 磷钼酸分化时要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定，一般1-2min。
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