序列分析纯重组胰蛋白酶如何溶解使用,如何储存? 1)如何溶解重组胰蛋白酶冻干粉? 使用50mM HAc 溶解或稀释。 2)使用时,溶解液和最适pH缓冲溶液? 使用时,按照使用终浓度直接稀释在50mM NH4HCO3 或者ph7-8的酶切缓冲溶液中(含有目的酶切蛋白)。 3)酶切缓冲液中酶和底物的比例是多少? 在酶切缓冲液中建议使用1mM CaCl2, 重组胰蛋白酶:目的蛋白=1:20-1:100。 4)酶切时的缓冲液最适pH? 最适pH为7.0-8.0的缓冲液,通常用50mM NH4HCO3或者Tris-HCl。 5)溶解后溶液如何保存?如果反复冻融,稳定性如何? 溶液储存于-70℃。 可反复冻融5次,无降解,无活性损失。
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