淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）临床应用评价

临床医师

淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）临床应用评价
2013-08-29

张树文1，李珊珊2，钟娜3，雍刚4

（1.中国医学科院皮肤病医院 南京；2.吉林大学第一医院 长春；3.海南省皮肤性病防治中心 海口；4.四川省医学科学院.四川省人民医院皮肤病性病研究所 成都）

【摘要】 目的 探讨淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）(以下简称淋球菌/衣原体二联检测试剂)检测男性尿道分泌物、女性宫颈分泌物中淋球菌/沙眼衣原体的临床应用。方法 选取1086例怀疑为淋球菌/沙眼衣原体感染者的生殖道分泌物标本，检测其中的淋球菌和沙眼衣原体。淋球菌以培养法为金标准，沙眼衣原体以杭州艾康沙眼衣原体免疫层析试剂为对照，不符的标本用PCR确认，进行评价南京黎明淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂的临床检测性能。结果淋球菌/沙眼衣原体二联免疫层析试剂检测淋球菌的敏感性为97.51%，特异性为97.40%，准确性为97.42%；检测沙眼衣原体的敏感性为94.39%，特异性为99.55%，准确性为98.62%。  结论 淋球菌/沙眼衣原体二联检测试剂测定男性尿道、女性宫颈分泌物中的淋球菌/沙眼衣原体操作简单、快速、具有较高的特异性、敏感性和有效性，适宜临床应用。
【关键词】 淋球菌、沙眼衣原体、免疫层析法、培养法
Evaluation a new Neisseria gonorrhoeae/Chlamydia trachomatis Combo antigen rapid test(immunochromatography) with clinical specimen
Zhang Shuwen1, Li Shanshan2, Zhong Na3, Yong Gang4
1. Dermatology hospital of Chinese Academy of Medical Sciences, Nanjing; 2. No. 1 Affiliated hospital of Jilin University, Changchun; 3. Hainan Dermatology and Venereology Prevention Center, Haikou; 4. Dermatology and Venereology Institute of Sichuan Academy of Medical Sciences.Sichuan People’s Hospital
Abstract Objective: To evaluate the clinical application of Neisseria Gonorrhoeae/Chlamydia trachomatis Combo antigen rapid test (immunochromatography) in detecting secretion from male urethra or female cervix. Methods: Select 1086 cases of genital tract secretion specimen from suspect Gonorrhea/Chlamydia infect patient to detect Gonorrhoeae/ Chlamydia. Use culture as gold standard for gonorrhoeae detection; Another Chlamydia rapid test as comparison test for Chlamydia, the different results are confirmed by PCR, evaluate the clinical performance of Nanjing Liming’s Gonorrhoeae/Chlamydia combo rapid test. Results: In the combo test, Gonorrhoeae parts’ sensitivity, specificity, accuracy are 97.51%, 97.40%, 97.42% respectively; Chlamydia parts’ sensitivity, specificity, accuracy are 94.39%, 99.55%, 98.62% respectively. Conclusion: Use the Gonorrhoeae/Chlamydia combo rapid test to detect Gonorrhoeae/Chlamydia from male urethra, female cervix secretion specimen is simple, rapid, has high sensitivity, specificity and accuracy, can be used in clinical diagnosis.

    淋球菌，学名是淋病奈瑟菌，是淋病的病原体。淋病(gonorrhea)的主要表现为泌尿生殖道的化脓性感染，如尿道炎、宫颈炎和直肠炎等。如不及时治疗，淋球菌可侵入泌尿生殖道的其他部位，引起附睾、前列腺、输卵管及盆腔等器官的炎症，甚至可经血液传播到全身其他部位，形成淋菌性关节炎、腱鞘炎、心内膜炎、脑膜炎等合并症。但另一方面，也有5%～20%的男性和60%的女性病人呈现无症状经过[1]。淋病的实验室诊断对确诊淋病具有重要作用。

   沙眼衣原体是一种细胞内寄生的微生物，可侵犯眼、生殖道和其它脏器。沙眼衣原体引起的泌尿生殖道感染已成为常见的性传播疾病，它可引起男性尿道炎、附睾炎、女性宫颈炎、盆腔炎等多种疾病[2]，尤其是在与淋球菌等其他病原体合并感染时可加重疾病的发展并引起其它并发症。沙眼衣原体是引起尿道炎和宫颈炎的重要病原菌。由于受感染的病人中，有70%～

    80%的女性和多达50%的男性常表现为无临床症状[3]，所以其实验室诊断具有重要作用。

   本研究即试图评价南京黎明生物制品有限公司（www.limingbio.com）研制生产的一种基于彩色乳胶免疫层析技术开发的淋球菌/沙眼衣原体二联抗原快速试剂在临床中检测男女性生殖道分泌物中淋球菌/沙眼衣原体的应用。

1. 材料与方法

1.1 病人标本为2009年12月至2010年3月至以下医院门诊就诊的疑似淋球菌/沙眼衣原体感染患者男性尿道分泌物、女性宫颈分泌物标本：中国医学科院皮肤病研究所（医院）、吉林大学第一医院、海南省皮肤性病防治中心、四川省医学科学院.四川省人民医院皮肤病性病研究所。年龄在18-67岁之间。就诊前二周内有抗生素用药史者标本排除在外。

1.2 试剂

1.2.1 淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）为南京黎明生物制品有限公司生产。

1.2.2 淋球菌培养基：上海科玛嘉微生物技术有限公司生产。

1.2.3 沙眼衣原体免疫层析试剂：杭州艾康生物技术有限公司生产（衣原体对照试剂）。

1.2.4 沙眼衣原体荧光定量PCR试剂：广州达安基因股份有限公司生产（衣原体复核试剂）

1．3 仪器  ①隔水式电热恒温培养箱由上海跃进医疗器械厂生产。②ABI 7300荧光定量PCR仪。

1．4 方法 每个病人取4支拭子，第一支用于黎明淋球菌/衣原体二联检测试剂检测，第二支用于艾康衣原体免疫层析试剂检测，第三支用于淋球菌培养，黎明和艾康衣原体检测结果不一致时取第四支拭子用达安基因衣原体荧光定量PCR试剂盒进行检测。

以上检测均严格按照相关产品使用说明书进行操作。

2.结果

2.1 病例数：共检测1086例病人标本，其中男性标本528例，女性标本558例。

2.1 结果判读及统计标准：

2.1.1 淋球菌部分：以淋球菌培养结果为金标准，统计黎明淋球菌免疫层析试剂灵敏度、特异性和准确性。

2.1.2 衣原体部分：若黎明和艾康的衣原体检测试剂结果一致，即以该结果为准；若黎明和艾康的衣原体检测试剂结果不一致，则以第四支拭子的荧光定量PCR结果为准；统计时，以对照试剂和复核试剂的结果为扩大金标准，统计黎明衣原体免疫层析试剂灵敏度、特异性和准确性。

2.2 结果统计

表1 淋球菌男性标本检测结果

		培养法		合计
		阳性	阴性
黎明试剂	阳性	134	2	136
	阴性	3	389	392
总数		137	391	528

敏感性=（134 / 137）×100%=97.81%

特异性=（389 / 391）×100%=99.45%

准确性=（523/ 528）×100%=99.05%

表2 淋球菌女性标本检测结果

		培养法		合计
		阳性	阴性
黎明试剂	阳性	62	21	83
	阴性	2	473	475
总数		64	494	558

敏感性=（62 / 64）×100%=96.88%

特异性=（473 / 494）×100%=95.75%

准确性=（535/ 558）×100%=95.88%

表3 淋球菌综合检测结果

		培养法		合计
		阳性	阴性
黎明试剂	阳性	196	23	219
	阴性	5	862	867
总数		201	885	1086

敏感性=（196 / 201）×100%=97.51%

特异性=（862 / 885）×100%=97.40%

准确性=（1058/ 1086）×100%=97.42%

表4 沙眼衣原体男性标本检测结果

		扩大金标准		合计
		阳性	阴性
黎明试剂	阳性	105	0	105
	阴性	6	417	423
总数		111	417	528

敏感性=（105 / 111）×100%=94.59%

特异性=（417 / 417）×100%=100%

准确性=（522/ 528）×100%=98.86%

表5 沙眼衣原体女性标本检测结果

		扩大金标准		合计
		阳性	阴性
黎明试剂	阳性	80	4	84
	阴性	5	469	471
总数		85	473	558

敏感性=（80 / 85）×100%=94.12%

特异性=（469 / 473）×100%=99.15%

准确性=（549/ 558）×100%=98.39%

表6 沙眼衣原体综合检测结果

		扩大金标准		合计
		阳性	阴性
黎明试剂	阳性	185	4	189
	阴性	11	886	897
总数		196	890	1086

敏感性=（185 / 196）×100%=94.39%

特异性=（886 / 890）×100%=99.55%

准确性=（1071/ 1086）×100%=98.62%

3 讨论

    在淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）中，纯化的淋球菌/沙眼衣原体抗体包被在彩色乳胶上，检测时，当标本中有淋球菌/沙眼衣原体抗原时，先和包被有淋球菌/沙眼衣原体抗体的彩色乳胶结合，形成抗原抗体彩色乳胶复合物，由于层析作用该复合物沿着硝酸纤维膜前移，被固定在硝酸纤维素膜检测线上的另一个淋球菌/沙眼衣原体抗  体所捕获，形成一条红色的条带。若标本中没有淋球菌/沙眼衣原体抗原则不能形成红色的条带[4]。淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）具有操作简单、快速，不需要仪器设备等优点，非常适合于在基层和门诊现场开展。

    同时，淋球菌和沙眼衣原体经常是合并感染，据报道，约有50%的淋病患者合并有沙眼衣原体感染[5]。且两者症状相似，仅凭临床症状体征难以准确区分。两者的治疗方案也完全不同，因此世界卫生组织和卫生部均推荐淋球菌和沙眼衣原体需同时检测【6】。但是，在目前临床应用中，由于淋球菌和沙眼衣原体的检测方法不一样，导致在实际工作中往往不能同时检测淋球菌和沙眼衣原体，即使同时检测也极大的增加了医院的工作量。

    淋球菌和沙眼衣原体均好侵犯人泌尿生殖道柱状上皮细胞，如男性前尿道，女性宫颈管，两种微生物的感染部位相同。因此南京黎明生物制品有限公司研制生产的淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）在一次取样的情况下可同时检测这两种病原微生物。与金标准相比，淋球菌试剂对男女性标本的敏感性、特异性、准确性分别为97.81%、99.45%、99.05%；96.88%、95.75%、95.88%。沙眼衣原体试剂对男女性标本的敏感性、特异性、准确性分别为94.59%、100%、98.86%；94.12%、99.15%、98.39%。综合符合率为淋球菌敏感性为97.51%，特异性为97.40%，准确性为97.42%；沙眼衣原体敏感性为94.39%，特异性为99.55%，准确性为98.62%。因此该淋球菌/衣原体二联检测试剂检测男性尿道、女性宫颈分泌物中的淋球菌/沙眼衣原体具有较高的特异性、敏感性和准确性，对操作人员和设备均无特殊需求，适合于大规模推广。

参考文献

1.Hook EW, Zenilman JM, Gonorrhea, in Infectious Diseases[M],Second Edition, Saunders WB, Philadelphia PA, 969-974.

2.Brunham RC, Maclean IW, Binns B, et al.Chlamydia trachomatis: Its role in tubal infertility[J]. Journal Infectious Disease, 1985; 152:1275–1282.

3.Schachter J, Grossman M, Sweet RL, et al. Prospective study of perinatal transmission of Chlamydia trachomatis[J]. JAMA, 1986; 255:3374-3377.

4.Matthews R, Ridgeway G, Carder C,et al. Evaluation of a New Rapid Immunoassay (Clearview Chlamydia MF) for the Detection of Chlamydia trachomatis in Female Endocervical Swabs and in Male Urine Samples[J]. Sex Transm Infect.2006;82:33-7

5.Miller MJ, The laboratory diagnosis of Chlamydia trachomatis and genital mycoplasmas [J].Journal Med Tech, 1985: 2(8):507–512.

6.Gerbase A, Rowley JT, Mertens TE, Global epidemiology of sexually transmitted diseases[J]. Lancet 351:(S3) 2-4.

阳光的梦

貌似把临床实验报告当论文发表了？？？

Money姐

哈哈，确实是临床报告。