蛋白抗体纯化——NHS琼脂糖磁珠说明书

enriching

【产品名称】NHS琼脂糖磁珠

【产品型号】MAg25K/NHS

【目 录 号】P10

【产品介绍】

Enriching Beads® NHS琼脂糖磁珠以交联琼脂糖为基质，拥有良好的刚性、磁响应性和单分散性，表面修饰有丰富的N-羟基琥珀酰亚胺(-NHS)，能够与含氨基的生物配体，如：蛋白质、抗体、寡聚核苷酸和药物分子等通过共价偶联的方法实现结合。

与传统的羧基、氨基磁珠相比，表面含NHS基团的磁珠无需事先采用EDC或戊二醛进行活化，只需简单地将含伯胺基的生物配体溶解于偶联缓冲液中，室温下将蛋白溶液与NHS琼脂糖磁珠混合1~2hr便可将生物配体共价偶联到磁珠上，具有操作简单、偶联条件温和、生物配体偶联快速高效的优点。

【产品规格】

平均粒径	25μm
固形物浓度	10% (v/v) medium slurry
分散液	DMAC
表面配基含量	40~80μmol/mL纯磁珠(100% v/v)

【产品特点】

2 生物偶联方式简便高效；

2 快速的磁响应性；

2 生物样品中良好的分散性；

2 丰富的配体特异性结合位点；

2 高结合载量；

2 低非特异性吸附。

【作用对象】适用于含伯胺基的蛋白、多肽、核酸、药物等生物配体。

【有 效 期】两年（2~8 ℃无水密封保存）。

【偶联准备】

1.     离心管，磁力架；

2.     反应缓冲液：0.1M MES, 0.15M NaCl, pH6.0；

3.     封闭缓冲液：0.2% BSA, 0.1M MES, 0.15M NaCl, pH6.0；

4.     清洗缓冲液：50mM Tris-HCl, 0.15M NaCl , pH7.2；

5.     需要偶联的目标蛋白、抗体等生物配体；

【操作流程】

1.     将磁珠混合均匀，取500uL磁珠(10%,v/v)加入到2mL离心管中，磁性分离去除上清液。

（说明：“磁性分离”指将离心管置于外加磁场中，至磁珠吸附完全，约需要30s。）

2.     加入1mL无水乙醇，混合均匀，磁性分离去除上清液（重复1次）；

3.     加入200~500μg抗体或者蛋白质溶液（提前用500μL反应缓冲液溶解），室温旋转混合2hr，磁性分离除去上清液；

4.     加入1mL封闭缓冲液，混合重悬磁珠，室温旋转混合2hr，磁性分离去除上清液；

5.     加入1mL清洗缓冲液，混合重悬磁珠约30s，磁性分离去除上清液（重复3~5次）；

6.     将上述磁珠分散于0.5mL PBS, pH 7.4短期保存，或分散于PBS, pH 7.4, 0.1%BSA, 0.02%NaN3长期保存。

【注意事项】

1.    偶联过程中不应含有除目标配体外含伯胺基团的物质，如：甘氨酸、BSA、Tris-HCl等，请注意您的抗体、蛋白质溶液是否含有上述物质；

2.    磁珠使用和保存过程中应避免反复冻融；

3.    NHS琼脂糖磁珠不可干燥；

4.     不同抗体和蛋白与NHS琼脂糖磁珠的结合能力不同，客户可自行优化加入不同的抗体或者蛋白量；

5.     此磁珠对湿度敏感，用完请及时密封，放置于2~8 ℃保存，使用前请将其恢复至室温后使用。

【其它】

该产品可配合英芮诚核酸提取仪（订货号ETP-300）进行自动化操作 ，也可以配合多功能磁力架（订货号CQT-0011）、16位磁力架（订货号CQT-0001）、手动磁性萃取指套（订货号CQT-0008）进行手动操作。

可通过查看英芮诚官网了解产品详情MAg25K/NHS，或者关注我们的微信订阅号