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[讨论] 关于侧向层析的C线问题

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发表于 2018-3-12 17:38 | 显示全部楼层 |阅读模式

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如题,胶体金和荧光定量层析产品,都需要在检测区域设置一条C线(质控线);
胶体金产品说明书通常会指出,C线若不显示则代表产品无效\本次检测结果无效;荧光定量也如此
以胶体金为例:胶体金标记的是鼠源抗体,那么正常应该在C线处包被羊抗鼠IgG用以做质控线,来以此对金标抗体的结合有效性进行确认,进而判断本次检测是否有效。然后现在很多是用单独的C线控制系统,跟胶体金标记的检测抗体来源完全没有关系了;包括荧光层析的也是如此。
那么是否可以因此认为最初的C线设计是多此一举(我个人的答案是否定的);
反过来实际情况是很多这样做的,大家可以就此讨论发表一下看法?C线设计的合理性,各种方案的优缺点?
尤其对于定性胶体金(非比带法的),只要出现T线就可以判断为阳性,是否甚至可以不要C线

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发表于 2018-6-7 10:20 | 显示全部楼层
C线是与标记抗体的Fc段反应,而抗体与抗原反应是Fab的事,就好比你给脚拍个X光片,大夫不能下结论说你的手没问题。
所以C线的作用,并不直接表明标记抗体有效,但却可以反应层析是否正常,如果产品有问题,导至金子不层析,或者加样出问题,少加或者漏加了,这时没有T线出来,当然不能说样本中没有待测物了,因为你的金子都没跑上去,C线都没出。
还有一种情况,金子跑上膜,但是未层析到C线和吸水纸,导至金子在膜上堆积,与T线非特异的结合,发生了没有C线的非特异反应,也是无效的结果。
所以从这个角度说,C线是必不可少的。另外C是针对标记抗体还是独立质控,基本能起到一样的效果,但是也有极端的情况,独立质控筛选后,释放一般都是不存在问题的,但是标记抗体千差万别,会有这么一种情况,金标抗体与金垫牢固结合不释放,而独立质控跑上去了,这就比较尴尬了。所以研发过程中需要全方位的评判结果。
另外独立质控的优势就是,简单,便宜,管你标记单抗、多抗还是抗原,都通用一种质控系统就好了。还可以避免T线太强导至C线太弱的极端情况。
另外在比色和定量上来说,c线的作用就更重要了,慢慢体会吧,打字太累了。
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发表于 2018-6-21 10:59 | 显示全部楼层
楼上王哥说的很详细哈,我接着说一下比色定量把,比色定量大部分看的是T/C,如果你觉得C没效果,那怎么玩,还有一点,比色定量还需要多考虑阴阳性C的情况,怎么让自己的定量准确度提高都和C有莫大关系
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