试纸条出现堵膜

hudaoqi112 · 发表于 2017-11-14 10:33

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请教大神：

本人所用微球大小300nm，偶联的各种条件都做了，但在NC膜与样品垫的搭桥处的NC膜上总有堵膜现象，不知道是什么原因？另外C线也总随T线的浓度增加而下降，C线采用的是兔IgG包被，羊抗兔标记，请大家帮忙分析一下，谢谢！

frsw1 · 发表于 2017-11-15 16:17

1.标记完后微球本身就已经凝集；
2.样品垫封闭液使微球凝集。

hudaoqi112 · 发表于 2017-11-16 09:24

frsw1 发表于 2017-11-15
1.标记完后微球本身就已经凝集；
2.样品垫封闭液使微球凝集。

标记完后没有出现凝聚，样品垫的封闭液含有BSA、WTEEN-20和糖，不知这会不会引起凝聚？另外我的C线用的兔IgG与羊抗兔组合，不知道为什么会随着T的浓度增加而降低？

jopek · 发表于 2017-11-16 16:05

在接口处残留肯定会有，只是残留的比例是不是稳定。这可通过T+C的信号问题来衡量。楼主的T信号增加C信号降低是一定的

涩涩的茶 · 发表于 2017-11-16 21:43

提高反应体系的PH，看看能不能改善聚集现象
所用兔IgG与标记单抗很可能存在非特异性结合

hudaoqi112 · 发表于 2017-11-17 11:59

谢谢各位大神，我再验证一下。

frsw1 · 发表于 2017-11-20 15:14

hudaoqi112 发表于 2017-11-16
标记完后没有出现凝聚，样品垫的封闭液含有BSA、WTEEN-20和糖，不知这会不会引起凝聚？另外我的C线用的兔 ...

那样品垫封闭液没有问题，标记也没有凝集，那就是5楼大神说的，反应体系的问题了。。。

SPHERE-MFCIS · 发表于 2018-1-9 16:49

标记过程中没有凝集不代表就没问题，注意超声的步骤必须做，这点很重要！另外就是提高整体PH，还有就是增强流动封闭，堵膜现象有多严重，最好能上图，更利于分析

无限 · 发表于 2022-7-6 13:30

我也是一样的问题，只不过我做的是尿液竞争法，请问你解决了吗

无限 · 发表于 2022-7-6 13:32

SPHERE-MFCIS 发表于 2018-1-9 16:49
标记过程中没有凝集不代表就没问题，注意超声的步骤必须做，这点很重要！另外就是提高整体PH，还有就是增强 ...

请问什么叫增强流动封闭？

吃一口美玉 · 发表于 2023-9-4 09:37

hudaoqi112 发表于 2017-11-17 11:59
谢谢各位大神，我再验证一下。

你好请问你解决了乳胶试纸条堵膜问题吗我现在也是做尿液竞争法也一样出现了堵膜问题想和你交流一下

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