医学干货︱T-SPOT：想说爱你并不是很容易的事！

纳兰烙烙

医学没有100%！对于这句话，很多人并不以为然。认为这种理念是一种领人不齿的折中主义。可是，我想表明的态度是：医学永远是不断接近真理的一门科学。所以，作为医学重要的组成部分、所有检测手段或许也是存在缺憾的，比如T-SPOT就是一种想爱却又不容易的检验方式。

“T-SPOT”实际上是检测试剂盒“T-SPOT.TB®”的简称。T-SPOT.TB是γ干扰素释放试验（interferon gamma release assay，IGRA）的一种，具体采用的检测方法是一种简化的酶联免疫斑点（enzyme-linked immunospot ，ELISPOT），用于体外检测外周血中经过结核分支杆菌特异性抗原激活的效应T细胞。

T代表效应T细胞，SPOT即斑点，TB代表结核。

T-SPOT.TB®由英国 Oxford Immunotec 公司生产

一、T-SPOT检测的机理是什么？

人体对结核分枝杆菌的免疫反应主要通过T细胞活化介导。对结核分枝杆菌致敏的T细胞，再次接受结核相关抗原刺激后，活化的效应T细胞（包括 CD4+和 CD8+T 细胞）能够产生γ干扰素，通过ELISPOT 技术可以检测产生γ干扰素的单个T细胞。ELISPOT检测是高灵敏度的，在细胞分泌的细胞因子扩散稀释前，其能够立即捕获细胞周围所分泌的细胞因子，灵敏度超过传统的酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）。

T-SPOT检测用来刺激T细胞的是结核分枝杆菌特异性抗原→ESAT-6和CFP10抗原，这两个抗原在BCG菌株和绝大部分非结核分枝杆菌（除外堪萨斯分枝杆菌、苏氏分枝杆菌、海分枝杆菌）中都不存在，因此有较高的特异性，跟卡介苗和绝大部分的肺结核分支杆菌无交叉反应。

所以，T-SPOT检测通过ELISPOT技术和特异性抗原，从原理上保证了其一定的敏感性及特异性。

二、为什么说T-SPOT检测既完美又不完美？

然而，T-SPOT检测结果却不能作为单独或是决定性的诊断活动性结核病的依据。

T-SPOT阳性结果仅仅提示患者体内存在结核杆菌特异的效应T细胞：即患者存在结核感染或者有可能是堪萨斯、苏氏、戈登或海分枝杆菌等少数几种非结核分枝杆菌感染引起的。但是否为活动性结核病，需结合临床症状及其它检测指标综合判断。

结核感染通常表现为显性感染和潜伏性感染。显性感染即活动性肺结核，在大多数传染病中，显性感染只占全部受感染者的一小部分。潜伏性感染又称潜在性感染，病原体感染人体后，寄生于某些部位，由于机体免疫功能足以将病原体局限化而不引起显性感染，但又不足以将病原体清除时，病原体便可长期潜伏起来，待机体免疫功能下降时，则可引起显性感染，潜伏感染期间，病原体一般不排除体外。

结核潜伏性感染（Latent Tuberculosis Infection, LTBI）具有发展为活动性结核病的风险。活动性结核与LTBI是结核分枝杆菌感染的不同阶段，IGRA检测的结核分枝杆菌特异性效应T细胞经特异性抗原刺激后释放的γ干扰素，在活动性结核与潜伏结核感染（LTBI）中均有释放。多项研究结果显示IGRA都只能判断是否感染结核，但无法鉴别活动性结核与LTBI。

因此，IGRA对活动性结核病的诊断价值有限。

另一方面，T-SPOT阴性结果提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。但是如出现以下情况 ，阴性结果却不能排除结核杆菌感染的可能：

1、因感染阶段不同（如标本是在细胞免疫发生前获取的）引起的假阴性结果；

2、少数免疫系统功能不全的情况，如HIV感染者、肿瘤患者、儿童等；

3、以及其它免疫学、实验非正常操作的差异。

综上所述，我们不能过分依赖TSPOT检测，其结果只能作为诊断参考依据，一句话：T-SPOT，想说爱你并不是很容易的事！

文章来自：孙峰医生