单克隆抗体的制备技术

笑看风云

针对一种抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体。当前几乎所有大型制药公司都有单抗研发项目。在2011年全球最畅销的20种药品中，美国辉瑞公司用于降低胆固醇的阿托伐他汀钙居于首位，达到133亿美元。2011年，全球生物制药产品的市场规模超过1550亿美元，占制药/生物制药产品的25%。不过，有研究数据表明，生物制药产品今后几年在全球市场上的占比将明显上升。据预测，到2014年，全球销售额前三大产品都将是生物技术药物（Avastin，Humira和Enbrel），届时它们的销售额合计将达到254亿美元。单克隆抗体药物已经成为生物制药中最为重要的一类：2011年销售规模最大的7种抗体药物的销售额达到了388.2亿美元，占整个生物制药市场份额接近50%；单克隆抗体仍是研发的热点，也将是未来生物制药行业发展的重要动力所在。

一、 基于杂交瘤技术的单抗制备

杂交瘤技术是在上世纪七十年代发展起来的一种抗体制备技术。杂交瘤技术发展到现在，已经相当成熟，主要包括以下几个环节：动物免疫（通常免疫小鼠） --> 取动物的脾细胞或淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合 --> 筛选识别抗原的单克隆杂交瘤 --> 利用筛选到的杂交瘤生产单克隆抗体。

杂交瘤技术是一种很有效地单抗制备技术，已成功地应用于制备各种检测用抗体和治疗用抗体，国内外很多高校及研究机构都建立了基于杂交瘤技术的单抗制备平台。但是，近四十年的杂交瘤技术的应用经验也表明，利用杂交瘤技术进行单抗的制备似乎更适合手工作坊式的生产方式，而很难真正实现流水线式的工业化生产。这主要是由于杂交瘤技术本身的环节多，细节复杂，对人的技能依赖程度高。这些原因不仅导至该技术难于实现工业化，也导至基于该技术的单抗制备的成功率低。事实上，低成功率（70%或更低）是目前基于杂交瘤开展单抗定制服务领域的一个普遍现象。正是由于杂交瘤技术发展比较成熟，而且技术门槛比较低，目前国内几乎所有的单抗定制服务都是基于杂交瘤技术平台，不同的单抗定制服务商只是在某些具体环节上稍有差异，其整体服务水平（包括定制周期，成功率等主要技术参数）并没有显著的差异。

二、基于噬菌体呈现抗体库技术的单抗定制


噬菌体呈现抗体库技术平台是在上世纪90年代初步发展和成熟起来的一个单抗制备技术平台，其基本步骤包括：构建大容量高质量抗体库-->将抗体库呈现在噬菌体表面-->利用目的抗原对抗体库进行高通量筛选-->阳性单克隆鉴定-->利用哺乳动物细胞表达系统制备重组抗体。

  与杂交瘤技术不同，利用噬菌体抗体库技术来制备抗体的技术门槛较高，涉及多种高新生物技术的综合应用，包括：大容量抗体库的构建技术，噬菌体呈现及高通量筛选技术，基因工程抗体技术，哺乳动物细胞高表达技术等。


来源：生物制药合伙人