TaqMan探针试剂盒阴性对照翘尾问题

huangchj03 · 发表于 2016-12-9 11:49

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用TaqMan探针研发时，经常遇到一些引物和探针几乎没有二级结构和互补配对区，但是做实验时，阴性对照或空白对照常常会在35cycles之后出现翘尾，大神们帮分析一下可能在哪个环节出问题了？

lideqiang323 · 发表于 2016-12-13 10:45

首要还是引物探针方面分析，其次实验操作注意（可能是污染）；最后换不同厂家的PCR buffer

boys · 发表于 2017-2-27 17:09

应该是污染了，要不就是引物设计不好，

一个蝈蝈 · 发表于 2017-4-14 16:00

一般就是探针或引物被模板污染所致

Prudence · 发表于 2019-8-19 17:04

先克隆测序一下，看看是否是模板污染

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