液态活检：企业“抢分”$220亿市场却行路难，直击发展两大“拦路虎”

检验之星

据BCC分析，2020年液态活检市场值将达220亿美元，目前已有多家公司和机构引进了循环肿瘤DNA（ctDNA）技术，准备进攻该市场。然而，这些企业在液态活检市场上走得并不顺利，面临着政府监管和技术发展障碍。

1多家企业抢分液态活检市场

早在1948年研究人员就在人类血液中标识了人类DNA，1977年标识了癌症患者的血液DNA。2013年，香港中文大学 Dennis Lo博士开发了患者血浆游离DNA无创癌症检测技术。在Lo博士引领的试验启动前，意大利癌症研究治疗机构的Alberto Bardelli博士就对患者肿瘤DNA中的KRAS突变进行了研究，这些患者的肿瘤已对表皮生长因子受体抑制剂产生抗性。2014年，约翰霍普金斯癌症研究中心的研究人员发现，血液中由肿瘤脱落的DNA片段可用于无创性肿瘤早期检测、监测治疗反应及探索肿瘤抵抗治疗的原因。

目前约翰普金斯的一家公司，Personal Genome Diagnostics (PGDx)已开发了一个肿瘤筛选平台，包括全基因组测序、全癌症panels、目标panels、组织单基因分析、液态活检以及伴随诊断等，该公司在去年10月份获了2140万美元的A轮融资。致力于ctDNA检测的开发商还有Boreal Genomics、Trovagene和Natera等。

Boreal Genomics是血浆游离DNA突变检测分析产品OnTarget™的 开发者，Trovagene开发了尿液ctDNA分离技术、Natera所研发的技术被伦敦大学癌症研究所用于840名患者的ctDNA 突变检测，聚焦肺癌如何发生变异，如何对治疗产生耐药性。另外一家初创企业 Guardant Health于今年1月7日宣布关闭1亿美元的D轮融资。

今年1月份，世界领先基因测序公司Illumina对外宣称将创建一个新公司——Grail，致力于开发一种不超过1000美金的血液检测，用于多类型癌症的早期筛查。Illumina预计Grail于2019年上市，届时将作为测试中心与医院形成合作网络。

Grail公司发言人表示目前公司打算在2017年开始临床试验，“考虑到目前FDA正在讨论关于LDTs的监管，我们在等待FDA更新指南，Grail最有可能在2016年上半年推出最合适的策略并继续前进。继续前进意味着与FDA共同讨论最终的检测监管途径等问题。”监管途径包括明确测试开发商可研发的范围，明确什么样的检测验证机构认为符合标准等。

2液态活检企业遭FDA质疑，行路难

去年9月份Pathway Genomics公司以299-699美元推出CancerIntercept Detect™ （癌症截获检测）产品，引起了FDA的愤怒。2015年9月21日，FDA书信通知Pathway公司的创始人及CEO Jim Plante，FDA表示该产品似乎满足设备所要求，因为它包含了血液采集管，然而他们对Pathway网站上发布的白皮书（声称该产品至少能检测出10种不同的癌症）表示质疑。

FDA体外诊断及放射保健部患者安全及产品质量办公室主任James L. Woods说，“我们认为Pathway公司提供了没有足够临床验证的高风险测试，且可能对公众造成危害。”Pathway公司对FDA的声明进行了反驳，“我们在测试开发的过程中已经进行了适当的验证测试，如今我们也在进行更多的研究。”

在FDA发表声明之后，Pathway公司针对CancerIntercept Detect产品启动了两项临床研究。其中一项研究将对1000名以上患者进行9种癌症驱动基因96个ctDNA突变检测，另外一项研究将对200名患者进行评估以判断ctDNA检测是否可检测癌症和癌前病变症状，这些患者同时将进行结肠镜检查。

Pathway公司CEO Plante表示，该公司还启动了关于CancerIntercept Detect™监视器的第三项临床研究。这三项研究都涉及了Li-Fraumeni综合征、肺癌和甲状腺癌的筛查。Plante说，“我们与FDA的对话仍在进行中，我们将与FDA会面并给与答复，我们希望在不久的将来达成一个协议。”然而，他拒绝透露如何回复FDA的质疑。

FDA坚称不想破坏ctDNA的发展或停止新技术的发展。FDA的发言人Eric Pahon说，“我们不想扼杀人们了解自身遗传信息的机会，但确保人们获得正确答案、确保测试的安全有效性也至关重要。”

FDA对Pathway公司的审查恰逢该机构发布高风险实验室检测（lab-developed tests,LDTs）最终指导计划的关键时期，虽然FDA的指南草案对盈利诊断机构的研发人员更有利，但盈利机构与非盈利机构都对此发出反对的声音。

FDA发言人Pahon说，“如果一种测试未花费一点时间和金钱来通过FDA的评估测试就能存活在市场上，且给开发商带来金钱效益，那么这看起来非常有吸引力，但这也是LDTs管理的必要性。”

3液态活检发展面临两个障碍

监督审查是ctDNA 检测需要克服的第一个障碍，另外一种障碍是解决技术发展面临的悬而未决的问题。

生命科学/医药行业高级执行董事Harry Glorikian说，“第一个问题是ctDNA检测的最终对象是否为无症状且也不会发展为癌症的患者？这会对非严重患者带来不必要的治疗。”

“给干预确定一个阈值，这将更加困难”，Glorikian说，“如同大海捞针，检测的敏感度是否够？是否能精确排除癌症？是否揭示组织的来源？该组织是否是原发肿瘤部位或转移灶？”

Glorikian补充到，“另一个挑战包括分离DNA的标准，涉及覆盖深度、生物标志物的选择、结果的可重复性以及不明变体的影响，这些都需要大型前瞻性试验进行验证。”

健康行业资深分析师Frost & Sullivan说，“由于肿瘤负荷、肿瘤发展阶段、细胞流动等影响，ctDNA是高度可变的，因而高灵敏度也是至关重要的。”

Ravishankar说，“对于ctDNA检测，第三个突出的问题是临床证据：突变效用性的证据、当前检测ctDNA的敏感性、当前技术繁琐的工作流程，而解决这三个问题又会带来其他的问题。”

备注：本文根据GEN网站编译、整理

来源：生物探索