第13届中国肺癌高峰论坛会议报道 ——规范与精准同行：液体活检和二代测序步入临床

检验之星

3月里的羊城，格外绚烂。屋外，百样明花齐开放，尽显浓浓春意；屋内，肺癌大咖共聚首，探讨学术真知。就在今天，第13届中国肺癌高峰论坛如期而至。

本届高峰论坛的主题为——规范与精准同行：液体活检和二代测序步入临床。可谓既有传承，又不乏创新。沿袭既往高峰论坛的宗旨，聚焦于在临床实践应用时颇具争议的问题，进行深入探讨，达成共识，推进肺癌规范化诊疗。液体活检和二代测序技术作为当下推动肺癌研究的重要原材料＋催化剂，既有极高的科研价值，又具备改变临床实践的巨大潜能。新技术要真正步入临床实践，需要投资者和研发部门的投入，临床研究者的关注以及政府机构的扶持。鉴于此，本次高峰论坛云集了各方精英，既有来自创新产业的首席科学家介绍最前沿的技术；又有临床科学家深入剖析临床实践，提出转化研究的重要方向；最后还邀请到政府监管部门带来全新的政策解读。汇聚三方面的智慧，热情的分享交流，探讨出真正符合产业发展、优化临床实践并最终造福患者的共识。

闲言少叙，进入正题。大会分别从“二代测序推动肺癌精准医疗发展；液体活检优化晚期肺癌靶向治疗；液体活检助力肺癌早诊/术后监测”三大主题进行深入探讨。每一主题均设有技术解读，临床转化和热点讨论等环节。最终形成“液体活检和二代测序临床共识”。小编全程认真聆听，第一时间向大家分享会议精彩内容和新鲜出炉的共识。

主题1：拨云雾得见红日：二代测序推动肺癌精准医疗发展

本议题中，特别邀请到燃石医学揣少坤博士和陆舜教授分别从技术和临床转化层面深入解读NGS。此外，还设置了两个热点讨论：“如何利用NGS开展临床试验”，“临床实践哪一类型的患者更适合进行NGS：驱动基因pan-negative肺癌？靶向耐药的患者？”。最后，刘晓晴教授进行本场主题的总结。下面节选部分会议精彩内容报道。

可能在很多临床医生印象中，NGS是一个非常完美的技术，通过少量的DNA即可捕获患者的遗传信息。殊不知，在这华丽外表的背后，技术的每一点进步都走的非常艰辛，每一步操作都需要非常严格的质量控制。揣少坤博士为大家总结NGS流程中非常关键的技术要点：1. 均匀地富集感兴趣的DNA。2. 在DNA层面检测多种变异形式。3.精细的样本前处理与QC。4.标准化自动样本管理。5. 选择合适肿瘤领域的测序平台。6.精确计算的测序深度。7.专注于临床意义的panel设计。8.定制化自动分析系统。9.突变临床意义解读数据库。如何实现理想与现实的完美对接，NGS平台能否真正在临床落地，需要工业界，技术人员与临床医生的通力合作，最后真正贴近的服务到患者的诊疗中。

陆舜教授临床层面介绍了NGS转化肺癌研究的实例。NGS有助于我们不断发现新的肺癌驱动基因，不断完善肺癌的驱动基因谱，并研发新的靶向治疗药物在肺癌的贡献。现在大家所熟知的RET融合基因、ROS1融合基因和MET基因14外显子跳跃突变等均是依靠NGS测序技术发现的，并且很快转化到临床，使得这些少见驱动基因匹配到相应的靶向药物。此外，EGFR除了其常见突变位点，一些少见突变，亦可以通过NGS检测出来。在日后的诊疗中，由于越来越多的原发或继发性耐药的发生，未来驱动基因的检测决不是一次性就可解决的问题，需要伴随治疗过程进行动态的检测，NGS的应用必不可少。同时也期待测序技术能够的不断发展优化，为未来根据驱动基因选择靶点治疗提供技术保证。

随着对肿瘤驱动基因的深入研究及少见驱动基因的发现，篮子试验和雨伞试验已经成为新型的临床试验模式。在国外，已有基于NGS技术开展了多个多基因平行的临床试验，如Lung_MAP, ALCHEMIST, MATCH等。在去年的CSCO大会期间，CSCO生物标志物委员会成立了中国肿瘤驱动基因分析联盟（CAGC），一方面旨在规范NGS技术的应用，同时探讨如何开展我国的临床试验。现场讨论环节中，一个非常热点的问题是：一个初诊的患者，我们是直接做NGS呢还是进行单基因检测？目前国内外的现状通常还是会有些选择进行有药物的单靶点初筛，对于常见驱动基因阴性的患者，可以考虑尝试NGS检测。

最后，刘晓晴教授进行本主题的总结。二代测序推动肺癌精准医疗发展——剑指何方？目前对NGS的应用，我们的疑问多过答案。主要集中在以下几个方面：1.如何对NGS技术进行标准化，制定癌症患者NGS技术使用指南，期待中国肿瘤驱动基因分析联盟（CAGC）的NGS技术共识。2. 大型临床试验，如“雨伞”和“篮子”试验，如何解读和理解基于特殊基因或特殊药物、特殊检测技术而设计的临床研究结果？研究结果是否可指导常规临床实践？3. 更先进技术的挑战：面对目前临床常规成熟且推荐的检测技术，二代测序的定位？（互补／替代？常规实践／研究探索？）；面对三、四代测序技术的挑战和优势，二代测序如何发展、保持和发挥？4. 在目前可获得靶向药物有限的情况下，多位点、实时动态检测，是否会陷入巧妇难为无米之炊的境地？5. 当利用NGS检测发现多个异常基时，如何合理安排药物治疗？我们期待NGS能推动肺癌精准医疗进入新高度，真正落地于临床。

主题2：春江水暖鸭先知：液体活检优化晚期肺癌靶向治疗

在本专题中，格诺生物何伟博士和王洁教授分别从分子生物学和临床应用两个层面介绍了液体活检两大常用材料——CTC和ctDNA。此外，还就两个目前临床实践中非常热议的话题展开讨论：“晚期初诊患者，液体活检 VS 组织活检”，“血浆biomarker动态监测与临床实践”。最后，周彩存教授对本专场进行精彩总结。部分会议精彩内容见下。

从生物进化的角度来看，肿瘤是一个极其聪明的物种，在肿瘤本身的发生发展及后续治疗药物的干预下，肿瘤的遗传学背景可能一直处于动态变化的过程。因此，仅根据初诊时穿刺标本所反映的肿瘤分子特征来指导肿瘤的后续治疗可能会产生偏歧，而外周血的检测是一种非侵入性的方法，相比于组织监测更加便捷，并能实现实时检测。目前，可用于液体活检的材料主要有CTC、ctDNA、循环microRNA和Exsome（外泌体），前两者是目前研究的焦点。从100多年前外周血CTC的发现到现今CTC计数用于乳腺癌、肠癌及肺癌预后预测的故事大家已非常熟悉。然而，现在对CTC的研究已不能仅仅满足于计数，更希望通过利用CTC的分子特征去窥测原发肿瘤，探寻肿瘤转移的机制以及建立CTC细胞库进行药敏试验。

在何伟博士的主题发言中，提到了一个非常有意思的hypothesis：肿瘤释放多克隆CTC进入循环系统，在循环系统的环境压力下选择进化从而逃脱免疫／药物杀伤。CTC在循环系统里和免疫系统密切接触，充分的获取免疫系统信息。筛选过的CTC回到原发灶将进化的信息传递给原发肿瘤，可以帮助肿瘤进化逃避免疫／药物杀伤。在这个设想中，CTC好像是原发肿瘤派出的“间谍”，如果我们能捕获这些“间谍”，加以改造，可否实现“反间谍”呢？

王洁教授的主题发言“液体活检在晚期肺癌的临床应用”，总结了目前利用ctDNA在肺癌分子靶点检测，动态监测及耐药机制探寻上的应用，总体而言，研究结果非常鼓舞人心。以血浆EGFR突变检测为例，多项meta分析显示外周血EGFR突变监测的敏感性为60-70%，特异性90%以上，并具有较高的临床疗效预测准确性。基于前期的研究，血液检测在临床应用前景非常广泛，王洁教授也大胆突出了5大应用前景设想：1. 未来，血液检测先行，组织活检作为补充；而现阶段应该加强组织、ctDNA和CTC三种组织的互补；2.探寻分子耐药到临床耐药的最佳界值，实现对耐药的应对从治疗到预防的转变；3.以外周血驱动基因定量检测为基础探索不同的治疗策略；4. ctDNA深度分析有助于发现新的耐药基因；5.基于单细胞的全基因组、外显子组、转录组的分析将有助于更深入的洞察肺癌的耐药和转移机制并实现对其监测。

对于晚期初诊患者，组织活检和液体活检到底该如何抉择？首先我们应该明确液体活检和组织活检各自的优势与不足（见下表）。会议现场大家也展开了激烈的讨论。多数观点主张，液体活检现阶段只能作为组织活检的补充。

关于血浆biomarker动态监测能否用于疗效评价，其问题的实质在于，完美理想与残酷现实的对决。在其真正要走入临床实践时，我们尚存在众多的问题。在此引用周清教授总结图。

主题3：小荷才露尖尖角：液体活检助力肺癌早诊/术后监测

在本专题中，厦门艾德朱冠山博士，思路迪熊磊博士分别介绍了血液EGFR突变检测技术革新历程和如何构建精准医疗体系满足“未满足的需求”。朱冠山博士介绍到，目前可供选择的血液ctDNA检测技术非常多，但我们必须明确检测目的：临床应用还是研究应用。每一种检测方法都有其各自的优势和目前获批的适应证（总结见下图）。

本场的主题是液体活检用于肺癌筛查和术后监测。近年来，高敏感技术的产生使得CTC和ctDNA用于肺癌早期诊断和复发监测成为可能。然而，目前在肺癌领域，液体活检用于早筛、辅助诊断抑或术后监测，还仅限于科研探索，亟待大规模的临床研究验证。借用杨帆教授的总结：“液体活检用于肺癌筛查和术后监测——理想很丰满”。

一天的激烈讨论之后，众所期待的吴教授总结共识终于与大家见面。

共识一

精准医学是一项系统工程，包括：

1.        发现具有临床意义的基因异常（包括可靶点抑制、预测和／或预后标志物）；

2.        发明可靶向特异基因异常的药物；

3.        寻找证明其特异的有效性安全性证据

4.        应用于临床证明了证据的可重复性。

任何一项缺少都不允许。

共识二

液体活检是一项富有挑战性的新技术，在精准医学中扮演着越来越重要的角色。

1. 液体活检的检测对象包括：循环肿瘤细胞，血浆DNA，Exosome。

2. 液体活检的检测技术包括：ARMS（包括superARMS）、ddPCR（包括BEAMing）。

共识三

检测已知的、单个临床可药物抑制的靶点，液体活检技术推荐ARMS法；检测已知的、多个平行临床可药物抑制的靶点，液体活检技术推荐NGS方法。

共识四

用于发现未知基因，探索疗效监测、预后判断和发现耐药机制等，液体活检技术建议使用NGS。

共识五

液体活检包括CTC和ctDNA可能用于肺癌早期诊断和复发监测，但目前仅限于科研探索。

共识六

NGS用于临床研究，需平衡患者利益、伦理要求和科学发现之间的关系，以患者利益为至上。

期待本次高峰论坛的共识，能促进液体活检和二代测序技术在临床的规范合理使用，真正实现肺癌的精准治疗。同时祝愿，这个走过了13年风雨历程，依然坚持陪伴着我们的中国肺癌高峰论坛，能精彩继续，惊喜不断。最后，小编和肿瘤资讯想代表临床肿瘤学工作者和肺癌患者们，对吴一龙教授及其团队，以及所有的讲者们道一声感谢，您们的辛勤付出和倾情奉献，为大家带来春日里暖心的学术盛宴，尽心竭力的为广大患者谋福利。

明天的会议将聚焦于肺癌新进展的探讨，网络同步直播也将继续，欢迎各位爱智求真的小伙伴们持续关注。

本稿编辑过程时间紧，仅节选部分汇报，不能详尽反映会议全部精彩内容，欢迎各位踊跃评论补充。本次高峰论坛最后达成的共识及相关证据将发表于《循证医学》杂志，敬请期待。

来源：肿瘤资讯   作者：Riesling