鉴于在昨天微信群类M3病例的讨论中,不少人对FISH技术很感兴趣。今天正好有时间,为大家简单介绍下FISH技术的基本原理。 荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization),简称FISH。基本原理:应用荧光染料标记探针DNA,变性成单链后与变性后的染色体或细胞核靶DNA杂交,在荧光显微镜下观察并记录结果。
现以t(9;22)的BCR/ABL基因为例介绍:以橙色(Orange)探针标记9号染色体的ABL基因片段,以绿色(Green)探针标记22号染色体的BCR基因片段。
当发生染色体易位的时候,断裂的标记有橙色、绿色的基因片段会融合在一起,人的肉眼看起来会为黄色(Yellow),即为阳性信号。
FISH计数的细胞大部分是间期细胞,但也能计数分裂中期细胞,在遇到一些复杂易位的疑难病例时,显得尤为重要。
下图为典型的阳性信号中期细胞 接下来是变异易位的阳性信号中期细胞
目前国内用于诊断的一般是标记单一融合基因的探针。也有多色FISH,但价格较为昂贵,国内多用于研究,少数也用于诊断。暂时就给大家介绍这些吧,都是很基础的知识,基本属于扫盲,很容易理解。
来源:检验医学网 作者:天津血研所 肖继刚
|