cfDNA的浓度在肺癌中是独立的预后生物标志物

检验之星

摘要

cfDNA在肿瘤学研究中受到越来越多的关注，主要是由于cfDNA中含有作为液体检测标志物的肿瘤DNA。NSCLC中，研究人员均推荐cfDNA作为患者监测和随访的标志物。但目前与此相关的临床研究有限，仍然需要大样本量和接受同质性治疗患者的相关研究进行验证。我们研究的目的是评估cfDNA的浓度在NSCLC患者中接受一个标准周期化疗后对患者预后产生的价值。

提取218名入组患者在接受含铂类药物化疗2-3周期之前和之后的cfDNA，用荧光定量分析提取的cfDNA。通过RECIST标准或患者生存期进行分析，探寻基线和化疗后cfDNA浓度的变化同治疗反应的联系。

基线具有较高cfDNA浓度的患者（前三分之一）比那些基线具有较低cfDNA浓度的患者（最低和中间）具有更差的无病生存期和总生存期 [中位总生存期 10个月（95% CI 10.7-13.9）VS 14.2个月（95% CI 12.6-15.8）]。在多变量分析中，增加基线cfDNA浓度是一个独立的预后因素。但是，我们没有发现cfDNA浓度跟患者的治疗反应之间有任何的联系。

cfDNA可能是一个评估NSCLC预后的生物标志物。但是cfDNA的总浓度无法预测化疗对患者的治疗效果。

结果

人群

自2005年至2010年，在Pharmacogenoscan研究中入组的537名患者中，共有218名患者满足本研究的入组的条件，包括147例腺癌，43例鳞癌，28例大细胞癌（表1）。中位随访时间为12.3（15）个月。总体来讲，176名患者为IV期，42名患者为IIIB。根据RECIST标准，无患者完全反应，51例患者部分缓解，132例患者疾病稳定，35例患者疾病进展。

表1本研究中患者的主要特点

cfDNA浓度和临床相关性

收集218名NSCLC患者基线和化疗后的血液样本，提取cfDNA，并用荧光法测定cfDNA的浓度。cfDNA的浓度分布在2.54 ng·mL&#8722;1 — 6451 ng·mL&#8722;1之间。化疗前后中位基线cfDNA浓度分别为29.5（37.0）ng·mL&#8722;1与28.9（38.1）ng·mL&#8722;1（p=0.421）。基线和化疗后的浓度均为显著相关（Spearman’s ρ=0.459，p<10-4）。

样本保存时间（2006-2010年）、基线或最终cfDNA浓度之间没有显著的相关性（基线与最终cfDNA浓度，Spearman’sρ=-0.022，p=0.746；ρ=-0.045，p=0.507）。此外，根据采样年份，cfDNA的中线浓度没有显著不同。

cfDNA浓度（包括基线和化疗后）与患者或肿瘤特征（诊断时的身体质量指数、TNM分期和病理类型）之间无统计学相关性。但是，我们发现在基线cfDNA浓度同ECOG评分之间呈现正相关。有趣的是，任意的两个变量都是相关的（ρ=0.239，p<10-4）。

晚期NSCLC患者的cfDNA浓度与肿瘤反应

三组患者的肿瘤反应（部分缓解、疾病稳定、疾病进展）在中位cfDNA浓度无显著差异（基线浓度和化疗后浓度）（表2）。此外，在三组患者接受治疗期间，患者的cfDNA浓度（基线浓度和化疗后浓度）同肿瘤反应之间无显著差异（表2）。疾病稳定组与部分缓解组与疾病进展组进行对比，未发现同cfDNA浓度之间的相关性。此外，根据患者基线cfDNA浓度（临界值22.26ng/mL，22.27-42.12ng/mL，>42.12ng/mL），将患者分为3组。根据3组患者的肿瘤反应，仍然未发现患者的基线和化疗后的cfDNA浓度的显著差异性（图1）。

表2 cfDNA浓度和根据RECIST标准评价的肿瘤反应

图1箱式图展示了根据RECIST标准获得的基线cfDNA浓度和化疗后cfDNA浓度：a)第一个三分之一；b）第二个三分之一；c）第三个三分之一

cfDNA浓度的预后价值

中位无进展生存期为6.9个月（95% CI 6.1-7.7个月），总生存期为12.3个月（95% CI 10.7-13.9个月）。基线cfDNA浓度较高的前三分之一患者（5.7个月，95% CI4.5-6.9个月，P=0.034）比其他三分之二基线浓度较低的患者呈现出一个更低的PFS（7个月，95% CI6.3-7个月，P=0.034）。将OS作为主要研究终点时，预示着cfDNA的基线浓度仍然具有重要意义，较高的前三分之一患者的OS为10个月（95% CI 10.7-13.9个月），后三分之二患者的OS为14.2个月（95% CI 12.6-15.8个月，P=0.001）（图2）。

在单因素分析中，我们发现疾病阶段、体力状态在诊断和反应率上同OS和PFS具有相关性。在多元回归模型中，利用患者的年龄和这些变量进行分析。基线cfDNA浓度的预测价值在这个多元分析中具有重要意义，跟OS和PFS具有显著相关性。至于OS，其相应的调整基线比率为100030（95% CI 100003-100057，p=0.028），这就意味着每增加1ng/mL的基线cfDNA浓度就会使患者增加0.003%的死亡风险。

图2 生存曲线：a)无进展生存期；b) 总生存期，根据cfDNA浓度划分患者（较高的前三分之一与较低的后三分之二）

信息来源：

Claire Tissot,Anne-Claire Toffart, Stéphanie Villar, et al.Circulating free DNA concentration is an independentprognostic biomarker in lung cancer. Eur Respir J 2015.

来源：靶向分子诊断