免疫荧光法快速定量检测全血β-HCG初步评价(艾可美)

检验之星

陆杰

1

，许中

2*

（1.苏州市相城区太平街道社区卫生服务中心，江苏苏州215137；2.苏州市立医院东区核医学科，江苏苏州215001）

摘要：

目的评价i-ChromaReader免疫荧光分析仪检测全血β-HCG的性能。方法40例病人同时采集全血及血清标本，分别采用BeckmanCoulter公司的DxI800全自动化学发光仪检测血清β-HCG为参考方法（X），以i-ChromaReader免疫 荧光分析仪检测全血β-HCG为试验方法（Y），以专业EPEvaluator统计分析软件的2种仪器比对模式进行统计学分析。

结果  试验方法与参考方法的误差小于允许总误差（TEa），两种方法检测结果的误差指数（EI）在可接受范围内，实验获得通过。

结论i-ChromaReader免疫荧光分析仪检测全血β-HCG与化学发光法比较，结果一致性良好；作为一定量检测全血β-HCG的POCT检测仪器，i-Chroma Reader更具简便、灵活、快速的特点，可在医院急诊、社区等应用。

关键词：全血β-HCG；POCT分析；2种仪器比对（2IC）；方法学评价

中图法分类号：R446.6  文献标识码：A 文章编号：1009-881X(2013)04-0741-02

人绒毛膜促性腺激素（HCG）是人体胚胎或滋养细胞疾病中的合体滋养细胞分泌的一种糖蛋白激素，大量存在 于孕妇或患者血中，相对分子质量39,000，由α和β两个亚 单位组成。HCG的α亚单位在结构上与FSH、LH及TSH相似，具有免疫交叉反应性。而β亚基是HCG所特异的决定 整个HCG分子具有生物活性和免疫反应特异性的关键。血 清β-HCG测定对早期妊娠诊断及先兆流产、异位妊娠和妊娠滋养细胞等疾病的诊断与治疗及预后观察具有临床价值[1～2]。

长期以来，临床采用尿胶体金试纸法和血清β-HCG化学发光检测，前者快速但仅能定性，而化学发光定量虽准确但一般耗时，不能当场得到结果[3]。i-Chroma免疫荧光分析仪的生产商，新近研发适用于β-HCG全血快速定量检测试剂盒，综合了两者的优点，可在20 min内得到结果，使快速定量检测成为现实。为验证该仪器在β-HCG临床检测中的适用性和准确性，本文采用i-Chroma Reader免疫荧光 分析仪定量检测全血β-HCG浓度，Beckman DxI 800化学 发光仪的结果为参比系统，以EPEvaluator软件统计，评价 i-Chroma全血快速定量检测β-HCG的临床应用价值。

1  材料与方法

1.1 仪器与试剂 试验仪器为韩国i-Chroma Reader免疫荧光分析仪，配套试剂为总β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒（杭州中翰盛泰科技有限公司），批号：XCXEB07C，有效期2014-01；参比仪器为美国Beckman Coulter公司的DxI 800全自动化学发光仪，配套试剂为β-HCG试剂，批号：16758403，有效期：2013-07。

1.2 检测对象  标本来源为2012年9月～2012年10月苏州市立医院东区妇产科门诊就诊的妇女共40 例，年龄18～64 岁。1.3 检测方法抽取静脉血分别置于EDTA抗凝管及血清管中，分别在i-Chroma Reader免疫荧光分析仪和DxI 800全自动化学发光仪进行全血及血清β-HCG检测，严格按照实验仪器和参比仪器的操作手册进行试验前的准备、检测及质控程序。

i-Chroma Reader免疫荧光分析仪通过激光激发检测板条上的荧光，全定量检测以pg/mL为单位的单个或多个分析标志物。检测系统由免疫荧光分析仪和检测试剂组成。采用免疫荧光定量技术，干化学层析方法。分析样本在板条上移动的过程中形成免疫复合物，通过检测区域和/或质控区域的值与分析样本不同的浓度获得的标准曲线，可检测 样本中分析物的浓度。检测β-HCG仅需全血50μL，加入 至检测缓冲液管中并充分混匀。吸取75μL混合样本加入到 反应板的加样孔中，室温下放置15 min左右，上机进行扫描 测，打印结果。

1.4 统计学分析  采用专业的EP Evaluator统计分析软件，以2 种仪器比对模式进行统计学分析，判断全血检测是否能替代化学发光法。

2  结果

2.1 β-HCG浓度范围分布   收集门诊病人有促凝剂的血清标本及EDTA•Na2抗凝样本40 份，用于相关性及偏倚分析。参照EP Evaluator两种仪器比对方案制备标本，收集本院门诊病人新鲜血标本，检测β-HCG水平，其浓度范围分布：＜10 mIU/mL 9 例（22.5 %），10～200 mIU/mL 11 例（27.5%），201～600 mIU/mL 13 例（32.5%），601～15,000mIU/mL 7 例（17.5 %）。

2.2统计学分析 两仪器比对（Two Instrument Comparison， 2IC）是一种简单直观的不使用线性回归的比对方法，判 断标准为：如果X方法和Y方法之间的差别在允许误差之内，即小于允许总误差（TEa）。本文设定β-HCG的TEa为5mIU/mL或20 %，40 份待检标本浓度范围0.19～14,345mIU/mL，i-ChromaReader免疫荧光分析法检测全血浓度与Beckman DxI 800全自动化学发光检测血清β-HCG具有较好的一致性，详见散点图（Scatter Plot）（图1）。

误差指数（ErrorIndex，EI）是Y/X与TEa的比值，检定每一对X-Y数据。超过5%的标本其EI指数大于1.0或小于-1.0是不能接受的，意味着方法间差异已超过TEa，实验失败。本次实验平均EI为-0.13，范围-1.12～0.92，最大的EI

（-1.12）发生在5,614 mIU/mL，97.5 %（39/40）标本两种方法检测结果的EI在可接受范围内，本次实验获得通过。

图1 i-Chroma检测全血β-HCG与参考方法比较的散点图与误差指数

3  讨论

免疫荧光干化学定量法是是一种将荧光标记技术、免疫检测技术和层析分析技术等多种方法有机结合在一起的 固相标记免疫检测技术，与化学发光技术相比有具独特优势。化学发光是灵敏度和精密度非常高的定量方法，但成本较高、操作难度大、不适合基层、不能快检以及筛查等技术瓶颈限制其更广泛使用。而免疫荧光干化学定量法具有效率高、简便、单人份随时检测等优点，可大大缩短病人等待时间。

i-Chroma Reader免疫荧光分析定量检测全血β-HCG，使得其临床应用范围更加广泛。金标试纸条定性只能判断是否怀孕，而先兆流产、异位妊娠、某些妇产科疾病、术后治疗过程等都需要对β-HCG浓度变化进行跟踪，定量检测全血β-HCG显得更加便利。特别适用于大型医院的急诊，社区基层医院等。

本文对40 例患者全血与血清β-HCG检测并进行比对，两方法间的相关系数为r=0.9688。两种仪器间小于5 %（2.5%）的标本其EI指数超出可接受范围（-1.12），数据表明免疫荧光分析定量检测全血β-HCG可应用于临床。

数据分析显示， 高浓度的β- HCG（ ＞1 , 000 m IU/ mL），其两种方法的一致性相对差些，但限于标本数不够，未能进行统计分析。同时也要看到，i-Chroma Reader免 疫荧光分析仪毕竟是POCT仪器，进行全血β-HCG定量检测有其局限性，在高浓度结果时，可用化学发光法进行复检，这样既发挥了快速检测的效率，同时又保证了结果的可靠稳定。

参考文献

[1]方 群, 主编. 妇产科检验诊断学[M]. 北京: 人民卫生出版 社, 2004. 99.

[2] 石清蒲,孙雪梅, 赵 晶. 血清游离β-HCG检测在妇产科的临床应用[J]. 中国实用妇科与产科杂志, 2006, 22(8): 634～636.

[3]   方从举. 胶体金试纸法和化学发光免疫法检测全分子HCG的观察[J]. 临床和实验医学杂志,2008, 7(5): 41, 45.

文章转自：中国血液流变学杂志.2013;23(4)