阴道分泌物常规检测技术研究进展

检验医师

妇科阴道分泌物常规检测（简称白带常规）是女性泌尿生殖道健康水平的一项重要医学检查项目，主要用于监测女性泌尿生殖道感染与否及种类。特别是孕前女性白带常规筛查尤为重要，患有阴道炎症的女性在受孕时会影响精子的质量甚至导至不孕，即使怀孕孕期也很容易引起宫内感染、产道感染等环节感染新生儿，造成流产、早产、先天发育畸形、智力低下等严重后果。因此通过白带常规筛查细菌性阴道病、滴虫性阴道炎、念珠菌性阴道炎等阴道疾病对女性优生具有重要的意义。

白带常规因医院及习惯不同，具体涉及的检测项目有些差异，但不外乎以下项目：pH值、白细胞（清洁度）、淋球菌、胺试验、线索细胞、念珠菌、滴虫。 由于镜检淋球菌只适合个别标本，针对性强，不能作为常规项目。因此白带常规中有实际操作意义的项目是白细胞（清洁度）、线索细胞、念珠菌、滴虫，另外乳酸杆菌由于其具有辅助判断作用也有医疗单位作为白带常规的项目之一。

近年来，白带常规一直采用显微镜镜检的方法，但是显微镜镜检存在诸如经验要求高、主观性强等缺点，在显微镜质量及涂片的均匀度等方面受限，而且仅从形态学上来鉴别，在灵敏度和特异性方面也存在严重问题，现今已无法完全满足临床检测的需求。近年来国内外一些科研单位有从事酶学等方法应用于白带常规检测的研究，其为白带常规检测技术发展起到了巨大的推动作用。

乳酸杆菌检测 乳酸杆菌为女性阴道的优势菌群，对有害菌诸如阴道加特纳氏菌等有抑制杀灭作用，过氧化氢是阴道微生态菌群中有益菌乳酸杆菌特别是产过氧化氢的乳酸杆菌的一种代谢产物，因此可以通过检测过氧化氢来反映阴道内乳酸杆菌量的多少。

白细胞检测 白细胞酯酶是白细胞膜上的一种蛋白质，炎症感染时白细胞特别是多形核白细胞由于趋化作用通过阴道上皮细胞粘膜渗透到分泌物中，通过检测分泌物中的白细胞酯酶活性可间接地指示白细胞的多少。

细菌性阴道病（BV）检测 BV检测试剂有两种方法学，改良胺试验克服了传统胺试验灵敏度低、主观性强的缺点；唾液酸苷酶又称神经氨酸苷酶，在阴道环境中，唾液酸苷酶活性与BV密切相关，与检测Amsel法有较高的符合率，国内外在相关试剂的研发上都做了大量工作，并已有产品用于临床检测。但是阴道微生态菌群中，普雷沃菌和拟杆菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌，部分加特纳氏菌有此酶活性，而动弯杆菌、消化球菌以及人型支原体的此酶活性基本不能检出。另外，BV不是单一而是多种厌氧菌增多引起的，因此单纯依靠检测分泌物中唾液酸苷酶的活性，必然漏检唾液酸苷酶活性低的厌氧菌增多引起的BV，另有研究显示脯氨酸氨基肽酶与加德纳菌和动弯杆菌相关，可以通过脯氨酸氨基肽酶活性的增加来指示BV，但是研究表明单纯由于普雷沃菌和拟杆菌增多引起的BV不含有脯氨酸胺基肽酶，因此也存在方法学上的漏检，但是将唾液酸苷酶结合脯氨酸氨基肽酶的检测，理论上可以检测95%以上的BV阳性。

念珠菌检测 随着抗生素、肾上腺皮质类固醇类药物的广泛应用，念珠菌病发病率逐年增高，白色念珠菌是最常分离到的致病酵母菌，因此，快速、准确地鉴定白色念珠菌具有重要的临床意义。脯氨酸氨基肽酶可由多种厌氧细菌和真菌产生，其也为白色念珠菌的特异性酶，乙酰氨基葡萄糖苷酶为白色念珠菌、热带念珠菌的特异性酶，因此可以通过检测脯氨酸氨基肽酶活性和乙酰氨基葡萄糖苷酶来指示念珠菌感染。

滴虫检测 研究表明滴虫具有乙酰氨基葡萄糖苷酶特异性酶，因此可以通过检测乙酰氨基葡萄糖苷酶检测滴虫。由此通过乙酰氨基葡萄糖苷酶检测无法区分念珠菌和滴虫，但念珠菌白带pH在4.0-4.6，滴虫白带pH可大于5-6，通过大量研究念珠菌白带pH不大于4.6，而滴虫白带pH不小于4.8，通过结合pH值可将二者区分开。

综上，将酶学的方法应用于白带常规检测项目检测中，只需检测过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶及pH。

酶学方法检测与显微镜镜检技术优缺点比较见下表：

目前国内有某细菌性阴道病三联检试剂盒（简称：某三联件），但是只能检测乳酸杆菌、白细胞（清洁度）、线索细胞，或者加上pH值，不能检测念珠菌和滴虫，同时存在漏检唾液酸苷酶阴性的厌氧菌增多引起的BV这一缺点。美国Femlab阴道炎检测试剂盒名为阴道炎六联检，但不能检测念珠菌，而且存在诸如检测意义不明确、三项指标都检测阴道炎、BV与滴虫无法区分、漏检滴虫等缺点。某阴道炎五联检试剂盒（简称：某五联检）通过检测过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶及pH六项指标可以检测乳酸杆菌、白细胞、BV、念珠菌、滴虫五个项目。

几种相关技术的比较见下表：

综上所述：据此酶学方法产品化后的阴道炎五联检试剂盒的研究，其在功能方面实现了白带的常规检测，可以互补甚至替代显微镜镜检。此研究在医学检测领域将是一个突破，一个新的发展。

来源：中华检验医学网