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被归类于半抗原的小分子通常由竞争性免疫检测方法测定,理论上,竞争性免疫检测方法灵敏度和特异性不如非竞争性免疫检测方法。近日,来自日本的研究人员建立了一种基于抗异型抗体检测半抗原的免疫检测方法,研究结果发表在《临床化学杂志》(Clinical Chemistry)。
研究人员使用了一种称作自动多样化库(ADLib)的体外抗体生产系统,获得了针对一种半抗原-抗体免疫复合物的抗异型单克隆抗体。研究选择性的使用雌二醇(E2)以及25-羟维生素D [25(OH)D]这两种半抗原作为分析物。通过使用96微孔板以及全波长自动化学发光分析仪,建立了检测这两种半抗原的免疫检测方法,并评价了这些检测方法的灵敏度和特异性。
这些检测方法在检测血清中的靶向半抗原时表现出了足够高的灵敏度。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测E2的最低检测量为3.13pg/ml,使用全波长自动化学发光分析仪检测系统检测25(OH)D的最低检测量是2.1ng/ml。相对于竞争性检测,这种非特异性竞争检测的免疫反应性衍生物的交叉反应性显著提升。检测E2的ELISA方法的变异系数为4.2%-12.6%(批内分析)以及6.2%-21.8%(总不精密度)。检测25(OH)D的CLEIA方法的变异系数为1.0%-2.3%(批内分析)以及1.9%-3.5%(总不精密度)。需要指出的是,检测25(OH)D的CLEIA方法与LC-MS/MS方法和商业化的(125)I RIA方法的相关性为r = 0.99。
综上所述,该方法代表了常规检测半抗原的一种潜在地简单可行的方法,这些半抗原包括维生素、激素、药物以及毒素。
来源:艾兰博曼网
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