不同的采血时间、不同的抗凝剂对糖化血红蛋白测定的影响

检验医师

近年来糖化血红蛋白H bA1c的检测正日益受到临床的高度重视, 它已成为糖尿病的筛选、诊断, 疗效考核, 血糖控制的一个有效指标。因此糖化血红蛋白H bA1c检测已成为糖尿病人的必须。为探讨糖化血红蛋白HbA1c测定中不同的采血时间不同的抗凝剂对结果的影响, 我们对28名糖尿病人, 33名正常人进行了采血检测。

资料与方法

      仪器与试剂: AU 5400奥林帕斯全自动生化分析仪, 试剂是英国朗道公司, 北京九强公司代理, 标准品货号HA3444,不需预处理需要1~ 6水平的标准。质控品货号HA 3445, 包括2个水平( 高值, 低值), 需要预处理。精密度: CV≦50%,

      准确度: 偏差不超过 10%, 灵敏度: 本试剂的最低检测线总Hb7g/d,lHbA1c为0.25g /d l。线性范围: 总血红蛋白7 ~23g /d,l HbA1c%的范围大约为1.8%至标准水平6的浓度。

      标本: 肝素抗凝真空采血管( 绿盖);EDTA - K2抗凝真空采血管(紫盖); 枸橼酸钠抗凝真空采血管( 蓝盖)。清晨空腹用1次采血针静脉采血分别放到不同的采血管内。颠倒混合数次以防凝固。餐后2小时用1次采血针静脉采血分别放到不同的采血管内。颠倒混合数次以防凝固。但不可剧烈震荡, 以防溶血。

     方法: 抽取我院内分泌科住院病人的标本, 年龄在25 ~ 55 岁28 人份。无脂血、黄疸、溶血, 建行体检人员的标本( 无糖尿病史), 年龄在22 ~ 56 岁33 人份。无脂血, 黄疸, 溶血。61 人份的标本血红蛋白均在试剂盒要求的线性范围内。于清晨空腹和餐后2小时分别抽取标本分装在不同的采血管内, 颠倒混合数次以防凝固, 但不可剧烈震荡, 以防溶血。所有全血标本在分析前要完全混匀。将标本放置30分钟后进行预处理, 10μl的全血与400μl血红蛋白变性剂混匀( 1: 4) 避免起泡沫。处理后的样本室温下放置10 分钟后上机进行测定。严格按仪器和试剂的标准操作规程检测标本, 按要求进行室内质控, 室内质控在控。

结果

      所有数据进行统计学分析。见表1。空腹与餐后2 小时测得的糖化血红蛋白H bA1c结果差异无显著性( P >0.05)。EDTA - K2 抗凝管: 枸橼酸钠抗凝管: 肝素锂抗凝管测得的糖化血红蛋白HbA1c结果均无显著性(P > 0.05)。即糖化血红蛋白HbA1c的测定不受采血时间的影响,不同的抗凝剂对其结果影响也不大。肝素抗凝的全血测得的结果略有偏高。

表1不同时间，不同抗凝剂所测得的糖化血红蛋白HbAlc的均值

	糖尿病人				非糖尿病人
	EDTA-K2管	枸橼酸钠管	肝素锂管		EDTA-K2管	枸橼酸钠管	肝素锂管
空腹	7.13±0.56%	7.17±0.52%	7.51±0.53%		4.85±0.67%	4.83±0.77%	5.28±0.74%
餐后2小时	7.15±0.55%	7.16±0.53%	7.49±0.55%		4.87±0.66%	4.83±0.76%	5.26±0.75%

讨论

        本实验结果显示, 糖化血红蛋白HbA1c的测定空腹与餐后的结果无显著性(P > 0.05), 也就说糖化血红蛋白HbA1c的测定不受时间影响。HbA1c是人体血液中红细胞内的血红蛋白与葡萄糖结合的产物, HbA1c是血红蛋白生成后与糖类经非酶促反应结合而成, 其合成速度慢且不可逆, 与红细胞环境中的糖浓度成正比。人体红细胞的寿命一般为120天, 在细胞死亡前血液中的糖化血红蛋白会保持不变, 它反映前8~ 10周平均血糖水平。因此与抽血时间, 是否空腹无关。HbA1c浓度与血糖升高程度和持续时间成正比, 即血糖愈高且持续时间愈长, HbA1c的浓度愈高, HbA1c值与血糖浓度呈明显正相关。HbA1c不能反映抽血时瞬间的血糖水平,三种抗凝剂所测得糖化血红蛋白HbA1c显示, 肝素抗凝可使结果偏高, 大约比EDTA- K2和枸橼酸钠抗凝的高0.5 左右, EDTA- K2和枸橼酸钠所测结果大致相同, 不影响测定结果。有文献报道肝素抗凝的全血4℃可保存2 天, 而EDTA -K2和枸橼酸抗凝的全血4℃可保存5天。由此实验看出测定糖化血红蛋白HbA1c最好用EDTA- K2抗凝全血。

        

作者：内蒙古林业总医院(呼伦贝尔)  史晓丹  蔡淑敏