检出限vs生物检出限

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1.检出限：以前我们讲过IUPAC定义的检出限（limit of detection，LoD），但是EP17-A文件中定义的LoD和IUPAC定义的LoD明显不同。在EP17-A文件中它是指样本中可被检测到的最低分析物浓度，可以在规定的可能性条件下予以检出，但还不能量化为一个确切的值［1］。当实际样品浓度等于LoB时，50%的样本检测结果低于LoB，其余50%的样本检测结果高于LoB，即含有分析物可以检测的量，所以β=50%。当实际样品浓度检测结果的第5百分位数的值等于LoB时，检测结果的95%超出了LoB，可以肯定含有分析物的量与空白明显不同，但有5%的结果低于LoB，即与空白没有差异，所以β=5%，LoD是这个样品的实际浓度，它是可靠检测到的最低实际浓度。若低浓度样品检测结果呈正态分布，其单侧5%分布的上限相当于LoB，此时的均值即为LoD，μs=LoD=LoB+1.645σs。如果样品的检测结果不呈正态分布，或不能转化为正态分布，可以按非参数方法估计LoD。此时，LoD=LoB+DSβ。DSβ即中位数和第5百分数的间距。

建立LoD：制备1～4倍LoB浓度的系列实验样品，批间或日间重复测定若干次共获得至少60个低浓度样品的检测结果，根据低浓度样检测结果的分布规律，按照参数检验或非参数检验的方法计算LoD。

验证LoD：在验证厂商声明的LoD时，建议对相当于厂商给定的LoD浓度的样品进行至少20次重复检测，估计结果数超过LoB的比例。若85%的数据高于LoB，则说明实验数据支持厂商声明的LoD。否则实验室应联系厂商，或建立自己的LoD。

2.生物检出限:生物检出限（biologic limit of detection，BLD）定义为某样品单次检测可能具有的最小响应量刚大于检出低限（LLD）响应量时，该样品内含有的分析物浓度［2-4］。这与EP17-A文件定义的LoD基本相同，只是实验要求的样本数和所用的统计方法不同。

建立BLD：以样品响应量随样品内分析物量呈正比例关系为例，通常的做法是制备几个浓度略高于LLD的低浓度样品日间至少重复测定10次，低浓度样品检测信号-2s（双侧95%分布范围的下限）或-3s（双侧99.7%分布范围的下限）刚大于LLD时，样品中所具有的分析物含量即为BLD。

参考文献

［1］Clinical and LaboratoryStandards Institute. Protocols for determination of limits of detection andlimits of quantitation［S］；ApprovedGuideline. EP17-A. Wayne, Pennsylvania：CLSI，2004：1-39.

［2］张秀明，庄俊华，郑松柏，等.临床化学发光免疫检验测定AFP的分析性能验证与实验方法［J］.中华检验医学杂志，2007，30:760-765.

［3］温冬梅，张秀明，王伟佳，等.化学发光免疫法测定AFP的空白限、检出限和定量检测限的建立与评价［J］. 临床检验杂志，2010，28:469-471.

［4］张秀明，温冬梅，王伟佳，等. 电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能评价［J］.中华检验医学杂志， 2011，34：1152-1157.