每日一技术之DPO引物

huangchj03 · 发表于 2015-1-29 09:01

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为吸引更多专业人员加入到本版块，今日起推出每日一技术分享，当然我的任务就是将技术名称列出来，更专业的同仁能积极的参与讲解，这是我心中的模式。
今天分享的技术名称是DPO引物-双启动寡核苷酸引物（Dual Priming Oligonucleotide，DPO）技术。
“DPO (dual priming oligonucleotide)引物主要用于多重PCR检测。
其原理是：在长核酸引物的中间加几个Inosine连接。这样引物的五撇端和三撇端就变得相对独立了。
DPO引物假说是：多重PCR难做的原因是因为非特异性引物错误地启动核酸合成。因此用DPO引物可以减少非特异性合成，因此就能增加多重扩增的特异性。”-百度知道上的标准答案。我在文献中看到的解读：“双启动寡核苷酸引物的设计方法简化了建立常规PCR方法的操作步骤，该DPO引物的设计分为两部分，中间用多聚次黄嘌呤肌苷连接，5’-端长18-25bp，3’-端长6-15bp，由于该类引物特殊的结构，引物自身以及引物间难以形成二级结构且对退火温度不敏感，实验过程中不需要对引物进行筛选以及对退火温度进行优化。同时，DPO引物与模版发生错配的几率小，因为只要有3个以上的碱基发生错配，就不会成功扩增，比常规PCR引物的特异性更强，所以利用DPO引物建立的PCR方法，其检测结果比常规PCR方法更为精确”。随后将分享已发表的相关文献和专利，便于进一步理解。