挥之不去的气溶胶问题

huangchj03

      以前做荧光定量PCR技术做实验基本上都是采用染料法，几天内把实验就做完了，基本上没遇到过气溶胶问题，这两年在公司做荧光定量PCR检测试剂盒，有时一对引物和探针反复使用，阳性样本和质控也反复使用，操作规范好还一点问题少点，但是一旦实验室有操作不规范污染了，后果太严重了，什么样的结果都来了，怎么都消除不了。酒精、次氯酸钠、紫外等能用得到用上了，但是在做这对引物的实验依旧出问题。
     昨天实验室一个小姑娘未经允许的情况下，那实验室一个很重要的引物做了一个实验，将含有抗污染体系的扩增产物稀释了108次方作为模版，验证UNG酶的效果，由于模板的稀释工作是在阳性间完成的，加样工作也是在阳性间完成的，结果不添加UNG酶的扩增体系出现了污染，即阴性对照出现扩增，还好一点就是含有UNG酶的没有问题，均没有扩增，但是不知道大家注意了没有，仅仅一次梯度稀释工作，就在造成了一次试验的污染，这很恐怖的，根据扩增的Ct值，每个阴性对照的反应管内至少“进入了”104copies模板。
    奋斗在一线的同志们，你们是如何避免气溶胶污染这个棘手的问题呢？

wolf

这个是很古老的问题了。一直没有很好的解决方式。

huangchj03

一个忠诚的建议：
1、在研发和科研实验开展时就加入抗污染体系，绝对是减少麻烦的最好方法；
2、实验操作人员务必确保操作规范后在安排研发工作；
3、日常的清理工作必须严格按照要求进行，绝对不能纵容属下偷懒行为。