病理技术是病理科的非常关键的组成部分。切片质量直接影响到病理诊断的效率。在Magee-Women Hospital进修期间,我去技术室(常规制片和免疫组化)体验了两天的技术员的工作,有了一定的感性认识。参观技术室首先要做好心理准备。因为技术员的工作是从凌晨4点开始的。因为CAP认证对于诊断时间(turnaround time, TAT)的要求比较严格,大约90%以上的病例第一天取材,第二天早上陆续切片就做好了,当天报告就可以签发。 4:30am的医院景色 4:30我到科里,包埋工作已经开始了,一天大概有800左右的蜡块,三台包埋机,首先是粗针穿刺标本、活检标本;再是大标本、胎盘。每种标本都有不同颜色的包埋盒,方便分类。因为是打号机打的,每一个都先扫描条码,显示具体标本类型、块数。穿刺组织放在蜡中会用一个小金属块(外形类似砝码,下面的形状是不同大小的长方形)压一下,同时放在滴蜡出口旁的小冰台上迅速放一下,最下面的蜡就凝住了,组织也就被固定住了。大的组织也可以用大的金属块压,也有用手指压的(没手套),手指再习惯性地冰上撮一下,蜡就掉了。有些长条形的管状的标本要竖着包埋,取材时不需要切,包埋盒上画个记号(⊙),包埋时再切成几段,包埋面就十分清楚了。刮宫标本都是用小口袋装的,用擦镜纸样的纸制成的,取材时连组织带水倒进去,大小刚好与包埋盒一样,也不会出现交叉污染。标本脱水完、纸一揭就是平平的完整的一块组织或是少一些的,用钝刀片刮下来,非常方便。 包埋进行过程中,切片就开始了。过程差不多,每一台切片机配一台电脑、一台标签打印机,扫一下条码,标签就打印了,穿刺标本往往要打印10多张标签。小标本要求有3个切面,穿刺标本小,每个切面相隔20μm,完整的5张一条共3条漂在水里。3张载玻片是一头是白色的,是普通的HE染色用的,每一条的第一张捞起。余下的4*3,12片用红色头的载玻片(用来做免疫用的)捞起自然晾干,如果需要可以用来做免疫。如果不需要,就扔掉了。活检标本的3个切面间隔是40μm都是严格操作的。另外有些不同的是蜡块不是直接放在冷冻台上的,而是用一个玻璃盆放点水,放在冷冻台上,再把蜡块放在冰水里,他们说这样表面有点水气容易切,特别是小标本。同样的玻璃盆也用在漂片的时候,会不会水温均恒些就没有问了。 免疫组化也是4点多就开始了,同样切片、打印标签。有7台自动染色机,Roche的6台、1台Leica Bond。4台新的Roche可以30张切片随时放入和拿出,这样会效率提高很多。Magee有大约60多种标记。如果没有的标记,切好片直接就送到UPMC其它医院去了。阳性对照组织会预先切好,放在标签一头。根据不同的标记有不同的对照组织。每一张免疫都有阳性对照,在其它医院做的就会有两张切片,一张是需要的、一张是阳性对照片。每一个蜡块还有两张阴性对照。 制片的时效性。从早晨8点开始,就源源不断地把当天的切片分给每一个病理医生,诊断工作就可以开始了。一般小标本会最早出来,特别是乳腺的穿刺标本,可以及时的开出免疫组化。11点之前定出的,当天下午就可以出片。11点之后的第二天出片。 工作量。13个技术员,每年的病理量是32000,HE切片有近22万。免疫组化30000多。每天切片大约1000张左右。 每张IHC切片的红线左边是阳性对照组织。中间两张是阴性对照。 切片室,切片机上面是打印标签的打印机 免疫组化室 Roche免疫组化机器 技术员
每日工作量清单 技术员会分批把制好的切片放在第一个医生的小格子里。
来源:病理世界
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