仲人前教授：解读“抗核抗体评估的国际推荐意见”

千姿百态

2014年8月20日，由浙江省医学会检验医学分会、浙江省医师协会检验医师分会主办的以“分享、协同、共进”为主题的2014浙江省检验医学学术年会在杭州召开。本次大会围绕检验医学专业领域的新理论、新技术、新进展，以及检验与临床关系、检验质量管理等话题展开。

在21日早上的大会主题报告中，首先是来自第二军医大学长征医院实验诊断科、实验诊断学教研室、全军免疫诊断中心、全军实验诊断重点实验室主任、博士生导师仲人前教授为我们带来了关于“抗核抗体评估的国际推荐意见“解读。

自身免疫性疾病的发生发展非常复杂，具有一定的遗传背景，有一定的家族聚集现象，即只要家庭成员中有一位患了自身免疫性疾病，其他成员患自身免疫性疾病的概率要较家庭成员中没有自身免疫性疾病的人群要高得多。此外，还有多种其他的诱发因素，比如环境因素中的感染、甚至食品、光照等等均可诱发自身免疫性疾病。

做自身抗体检测对自身免疫性疾病的诊断价值


今年5月，Annals of the Rheumatic Diseases (风湿病学年鉴)杂志刊登了一篇抗核抗体检测的专家共识，该共识经过众多临床和检验领域的专家讨论，最终达成25条建议。以下是仲教授为我们解读的细胞成分自身抗体（常指ANA）检测的推荐建议详细条文（该条文中第1-13条是关于ANA检测，第14-18条是关于anti-dsDNA检测，第19-23条是关于anti-ENA检测，另有两条是关于检测方法的）：

1、诊断系统性自身免疫性风湿病（SARD）需要一组特异检验；
2、ANA，anti-dsDNA和anti-ENA检测应作为SARD及其他自身免疫性疾病诊断程序中的一部分；
3、ANA检测是SARD实验诊断的第一级检验；
4、ANA检测主要用于诊断目的，而不是为了监测疾病进展；
5、IIFA是ANA筛查的参考方法。其他方法虽然也可以采用，但会出现不同程度的假阴性和假阳性。因此，其他方法阴性但临床强烈怀疑时，必须做IIFA；

6、实验室报告结果应注明检测ANA的方法；
7、基于多种特定抗核抗原混合物的（自身抗体）检测不应作为ANA检测或ANA筛查的方法；
8、实验室自制ANA，anti-dsDNA和特异性anti-ENA自身抗体的检测方法应按照国际标准（如WHO，CDC/IUIS）逐个标准化；
9、IIFA筛查ANA时所用二抗体应是荧光素标记的抗人IgG特异性抗体；
10、ANA-IIFA依赖于试剂、设备和其他因素，因而筛查稀释度可因地制宜。一个ANA异常的结果应是在正常对照人群第95百分位以上的滴度。通常而言，以Hep-2细胞为底物检测ANA评价成人人群SARD时，所用的稀释度为1：160；

11、ANA阳性时，推荐同时报告荧光图型和最高稀释度；
12、ANA-IIFA荧光图形的报告应采用标准化术语；
13、可能时，除了细胞荧光图形外，其他的细胞浆和有丝分裂荧光图形也应一并报告；

14、怀疑SLE时，如ANA阳性，则还需检测anti-dsDNA抗体；
15、检测anti-dsDNA抗体时，Farr试验和CLIFT（短膜虫免疫荧光检测）具有高临床特异性。其他方法的特异性较低，因而推荐这些方法检测阳性时再用Farr试验或CLIFT加以确认，并分别报告结果；
16、在报告anti-dsDNA结果时应包括检测方法；
17、anti-dsDNA结果的报告应该是定量的（或CLIFT半定量）；
18、应以相同方法用于anti-dsDNA的定量检测和SLE病情活动监测；

19、ANA阳性时，推荐还检测anti-ENA；
20、检验报告中应注明anti-ENA检测方法。如与IIFA或诊断偏差时，应考虑其他检测方法；
21、应分别报告anti-ENA（包括阴性结果）；如筛查结果为阴性时，只要注明哪项anti-ENA阳性即可；
22、当临床怀疑混合型结缔组织病时，推荐定量检测anti-RNP抗体；
23、当临床高度怀疑并要求检测anti-ENA时，不管ANA结果如何，也要满足临床需求，如anti-Jo-1对炎症性肌病、anti-ribosomal P对SLE、anti-SS-A/Ro对先天性心脏传导阻滞/新生儿狼疮/干燥综合症/亚急性皮肤狼疮；

24、每个实验室应验证检测ANA试剂盒推荐的cut-off值，推荐用来自当地的健康人群年龄和性别匹配的血清；cut-offs应定义为第95百分位；
25、每个实验室应验证检测anti-dsDNA和anti-ENA试剂盒所推荐的cut-off值。推荐用来自相关自身免疫性疾病、疾病对照和健康对照人群的足够量标本进行验证；cut-offs值用ROC曲线加以定义。

目前，国内研究显示自身抗体诊断的符合率相对偏低，这些均因缺乏标准化、缺乏规范化等因素所导至，这些都有待今后的努力去逐一解决。

新的自身抗体如抗载脂蛋白-A-I抗体、抗HDL抗体、HEp-2细胞高密度细颗粒荧光模式（DFS）或抗DFS70抗体、抗氨基甲酰蛋白（CarP）抗体、抗肽酰基精氨酸脱亚氨酶（PAD）抗体、抗胰腺酶原颗粒糖蛋白（GP2）抗体、抗去酰胺基麦胶蛋白肽（DGP）抗体IgG抗磷脂酶A2受体（PLA2R）抗体、抗电压门控性钾离子通道（VGKC）抗体等已经在系统性红斑狼疮类风湿性关节炎、炎症性肠病、麸质敏感性肠病、特发性膜质肾病、自身免疫性脑炎等疾病中作为诊断、辅助诊断或排除诊断应用。而自身抗体检测也开始在肿瘤、慢病丙型肝炎等疾病中应用，具有良好的临床价值。

（以上内容整理自仲人前教授在2014浙江省检验医学学术年会上的报告幻灯）
来源：Alabmed