主要内容有常规检查脑脊液细胞计数和分类、细胞学检查。
方法主要有:
(1) 细胞总数:a.直接计数法:如脑脊液标本系清亮或仅微混,可用此法。用滴管吸收已摇匀的脑脊液标本少许,直接充入细胞记数板计数室内,静置2-3分钟,在低倍镜下计数规定计数池内的细胞数(红细胞和白细胞总数)。b.稀释计数法:如标本中细胞过多,可用生理盐水或红细胞稀释液稀释,按上法在低倍镜下进行计数,其结果应乘以稀释倍数。
(2) 白细胞计数法:a.直接计数法:小试管内放入冰乙酸1-2滴,转动试管,使试管内壁沾有冰乙酸后倾去,然后滴加混匀的脑脊液标本3-4滴,数分钟后其中红细胞完全溶解,在充入计数室内,按上法计数。b. 稀释计数法:如白细胞过多,可用白细胞稀释液稀释,仍按上法计数,注意其计数结果应乘以稀释倍数。
(3) 白细胞分类计数:a. 直接计数法:白细胞直接计数后,将低倍镜转为高倍镜观察,依据细胞形态和细胞核的形态进行分类,共计数白细胞(包括脉络丛细胞和室管细胞或内皮细胞)100个,分别计算单个核细胞和多个核细胞所占的比例。b.染色分类法:将脑脊液标本离心,取沉淀涂片,制成均匀薄膜,置于室温下或37°C温箱内,干燥后以瑞氏染色,油镜下进行分类计数。报告方式与血液白细胞分类计数相同。
细胞计数时,须注意红细胞或淋巴细胞与新型隐球菌相区别:a.新型隐球菌具有“出芽”现象,不溶于乙酸,滴加0.35mol/L乙酸后,显微镜下仍保持原形,而红细胞被乙酸溶解消失,淋巴细胞的核和胞浆则更为明显;b.加印度墨汁(或优质绘图细墨汁)1滴,加盖玻片,高倍镜下见新型隐球菌有厚荚膜,不着色,而红细胞和淋巴细胞无此现象。
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