无创母血胎儿游离DNA检测技术的应用

检验之星

孙 芾
北京和睦家医院

　　经过几十年的努力，目前产前筛查的检测技术已经得到了很大的发展，孕早期和孕中期血清学产前筛查极大地降低了21三体、18三体和13三体等染色体非整倍体异常胎儿的出生率[1-5]。但是即使是目前最好的血清学及B超检测手段也存在着约5%的假阳性率和5-10%的假阴性率。目前胎儿染色体检测确证试验采样方法是羊水穿刺、绒毛活检或胎儿脐静脉取血，这类技术需要通过有创性采样手段获取标本，有致胎儿创伤、畸形、流产或宫内感染的风险，而且至少要等待3周后才能得到结果。因此开展一种准确、安全、快速、无创的产前诊断技术是现今临床和研究人员都非常关注的一个课题。

　　胎儿DNA最早可以在怀孕妇女末次月经后第5周就从能从5ml母静脉血中分离出来，大部分检测技术在9-12周时即可检出。母体清除胎儿游离DNA（cell free DNA, cfDNA）的速度非常迅速。正常健康的孕妇对于cfDNA清除的半寿期只有几分钟 。因此从母体外周血中提取的cfDNA可以实时反映此刻胎儿的基因状态，采样过程也不会对胎儿造成损伤。这些优点使其在产前筛查诊断方面有着广大的应用前景。目前一些研究机构和基因检测实验室采用二代高通量基因测序技术，结合生物信息统计分析系统，对母血cfDNA的测定结果进行分析评估后得出胎儿出现染色体非整倍体的风险值，筛查常见的数种染色体数量异常遗传性疾病。根据目前的报道来看这种检测技术染色体数据异常检查可信性高，准确度比血清学试验更好，敏感性达98-100%，特异性可达99-100%。2012年美国妇产科学会(ACOG)指南已经认可将cfDNA测定作为高风险非整倍体单胎妊娠妇女的产前筛查方法之一。在国外一些国家及中国港澳地区已经接受其为早孕筛查试验之一。

　　应注意的是，胎儿cfDNA检测技术目前还存在着一些不足。如无法检出某些可由细胞遗传学方法检出的其它染色体结构异常，只对染色体数量异常检出率较高。cfDNA筛查高风险的结果还需要经由羊水穿刺或绒毛活检予以确认。本筛查技术目前仅限于单胎妊娠妇女，利用此技术对多胎妊娠妇女的检测评估还不多见。胎儿cfDNA检测对于标本处理和检测设备有着较高的要求，将来不可能普遍在常规医院实验室开展检测。较高的检测费用也是制约此技术广泛应用的不利因素之一。由于这项技术问世时间还不很长，我国现有的产前诊断管理办法还未将其列为候选的筛查方法，目前这项检测技术并没有被我国政府部门正式认可，不能用于病人诊断。希望在不久的将来我国能制定无创胎儿cfDNA检测技术的规则，在规范化管理的前提下使该技术成为我国的产前筛查方法之一，提高人们健康水平。


　　孙芾，主任医师，现任北京和睦家医院组织病理和临床检验中心主任、和睦家医疗集团检验诊断部总监。兼任中华医学会检验分会常委和秘书长、中国医院协会临床检验管理专业委员会常委、中国医师协会检验医师分会常委、中华检验医学杂志编辑委员会副主编、北京输血协会理事，国际实验血液学会（ISLH）理事、美国病理家学会(CAP)实验室认可评审专家，美国病理家学会荣誉会员（IFCAP）等。从事检验医学工作近30年，发表论文近百篇，参与编写著作数十本

来源：中华医学会检验医学分会