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核酸纯化用硅胶膜销售,核酸纯化柱

发布者: boys | 发布时间: 2020-1-9| 查看数: 1815| 评论数: 0|帖子模式

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出售:核酸纯化柱,硅胶膜IVD分子诊断核酸提取用原材料。
www.abigen.cn

实验室测试资料:

核酸纯化柱的选择专题2:核酸纯化柱不同层(膜厚度)洗脱效率的比较;交流咨询QQ:1492876083         

本测试方法:         
通过质粒提取试剂盒测试不同厚度的硅胶膜,用50,100,150微升洗脱测定洗脱效率         
实验室设计         
1:选择实际层数为2,3,4,5,6,7,8,9,10层(1mm厚,相当于市场厚度的一倍,市场大多是0.5mm厚膜,可自行拆解观察厚度,不同公司厚度不一样)         
2:先用50微升体积洗脱测定一次浓度;然后将样品补充50微升洗脱缓冲液,将其从新加入核酸纯化柱洗脱测定浓度;第二次补充50微升洗脱缓冲液,将150微升缓冲液加入到核酸纯化柱再次洗脱测定浓度,测试硅胶膜的洗脱效率。         
3:起始浓度的菌液选取3mL测试(不同收集浓度的菌产量有差别,后面我们将进行测试)         
4:选择含PUC19质粒的DH5A菌作为提取对象。         
实验材料:         
含PUC19质粒DH5A菌株,分光光度计 。         
实验方法         
按照艾比根质粒小量提取试剂盒提取过夜培养的菌液,测定浓度。         
实验结果数据分析:         
PUC19质粒提取原始测量浓度数据:         
膜层数                                         
洗脱                                         
体积                                         
货号                                         
260/280                                         
260/230                                         
Conc. (Ng/ul)                                         
2层                                         
50ul                                         
P2-50/500/5000                                          
1.98                                          
2.23                                          
333.1                                          
3层                                          
50ul                                         
P3-50/500/5000                                          
2.03                                          
2.25                                          
260.1                                          
4层                                          
50ul                                         
P4-50/500/5000                                          
2.02                                          
2.24                                          
266.7                                          
5层                                          
50ul                                         
P5-50/500/5000                                          
2.01                                          
2.2                                          
251.9                                          
6层                                          
50ul                                         
P6-50/500/5000                                          
2.02                                          
2.26                                          
267.1                                          
7层                                          
50ul                                         
P7-50/500/5000                                          
2.02                                          
2.24                                          
268.5                                          
8层                                          
50ul                                         
P8-50/500/5000                                          
1.98                                          
2.19                                          
290                                          
9层                                          
50ul                                         
P9-50/500/5000                                          
2.0                                          
2.21                                          
272.3                                          
10层                                         
50ul                                         
P10-50/500/5000                                          
1.98                                         
2.18                                         
289.4                                         
2层                                          
100ul                                         
P2-50/500/5000                                          
2.09                                          
2.24                                          
163.5                                          
3层                                          
100ul                                         
P3-50/500/5000                                          
2.07                                          
2.2                                          
155.9                                          
4层                                          
100ul                                         
P4-50/500/5000                                          
2.1                                          
2.23                                          
166.1                                          
5层                                          
100ul                                         
P5-50/500/5000                                          
2.08                                          
2.21                                         
165.8                                          
6层                                          
100ul                                         
P6-50/500/5000                                          
2.1                                          
2.24                                          
161.7                                          
7层                                          
100ul                                         
P7-50/500/5000                                          
2.1                                          
2.24                                          
177.8                                          
8层                                          
100ul                                         
P8-50/500/5000                                          
2.07                                          
2.2                                          
177.3                                          
9层                                          
100ul                                         
P9-50/500/5000                                          
2.08                                          
2.21                                          
176.3                                          
10层                                         
100ul                                         
P10-50/500/5000                                          
2.08                                         
2.22                                         
182.5                                         
2层                                          
150ul                                         
P2-50/500/5000                                          
2.1                                         
2.18                                         
117.4                                         
3层                                          
150ul                                         
P3-50/500/5000                                          
2.11                                         
2.21                                         
111.7                                         
4层                                          
150ul                                         
P4-50/500/5000                                          
2.12                                         
2.24                                         
114.2                                         
5层                                          
150ul                                         
P5-50/500/5000                                          
2.12                                         
2.25                                         
116.3                                         
6层                                          
150ul                                         
P6-50/500/5000                                          
2.14                                         
2.26                                         
112                                         
7层                                          
150ul                                         
P7-50/500/5000                                          
2.12                                         
2.23                                         
123.1                                         
8层                                          
150ul                                         
P8-50/500/5000                                          
2.13                                         
2.27                                         
119.9                                         
9层                                          
150ul                                         
P9-50/500/5000                                          
2.15                                         
2.28                                         
122.9                                         
10层                                         
150ul                                         
P10-50/500/5000                                          
2.11                                         
2.25                                         
130.3                                         


图1 膜厚度和洗脱体积比较         
洗脱体积(图1)                                         
平均浓度(ng/ul))                                         
备注                                         
50ul洗脱                                         
250                                         
3ml菌液测试                                         
100ul洗脱                                         
150                                         
3ml菌液测试                                         
150ul洗脱                                         
100                                         
3ml菌液测试                                         
         
         
洗脱体积                                         
总产量                                         
备注                                         
50ul洗脱                                         
12                                         
3ml菌液测试                                         
100ul洗脱                                         
16                                         
3ml菌液测试                                         
150ul洗脱                                         
18                                         
3ml菌液测试                                         
         
洗脱体积                                         
洗脱效率                                         
备注                                         
50ul洗脱                                         
75%                                         
3ml菌液测试                                         
100ul洗脱                                         
95%                                         
3ml菌液测试                                         
150ul洗脱                                         
相对比较,假设100%                                         
3ml菌液测试                                         

结果分析及建议:         
  • 对于需要50ul洗脱体积的建议选择P2-P5厚度的膜,可以满足高浓度要求。                                 
  • 对于洗脱体积大于50建议选择p6-10的膜,产量增加。                                                         
  • 其它厚度的刻自行研究测试。                                                                                 
  • 不同菌液和质粒提取含量有所差别,具体选择生产企业可自行测试。                                                                                                         
  • 50ul洗脱效率大致75%,100ul洗脱效率大致95%。建议洗脱体积控制50-100ul左右,可增加洗脱效率。                                                                                                                                 
  • 对于不同配方试剂盒提取样品洗脱效率会有所差别,具体可自行测试研究。                                                                                                                                                         

说明:本次实验仅供参考,只是本实验室实验员操作测试对比数据,不同使用环境请自行研究测试。                                                                                                                                                                        
                                                                                                                                                                        
                                                                                                                                                                        



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