如何评价液体活检技术使得癌症早期阶段的筛查成为可能？

奋斗的小鸟

原文：液体活检技术使得癌症早期阶段的筛查成为可能作为传统活检的替代技术以及癌症早期筛查的新技术，液体活检技术通过非侵入性的血液取样方式获得肿瘤信息以辅助癌症治疗，是“精准医疗”领域中具代表性的诊断技术。
目前液体活检主要肿瘤来源的生物标志物分别是循环肿瘤细胞（CTC）、循环肿瘤DNA（ctDNA）、外泌体和循环RNA。这些物质均可以通过肿瘤周边的血管进入血液循环，通过抽取血液样本检测这些物质，可以用于肿瘤的早期诊断、疗法选择、预后判断和疗效监测等。
一、循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCells，CTCs)

原文地址：https://www.zhihu.com/question/284180597

队长是我

《CACA技术指南-液体活检》是国际上首个系统阐述肿瘤液体活检技术在临床应用的指南。该指南由中国抗癌协会发起，中国工程院院士、中国抗癌协会理事长樊代明院士担任丛书主编，空军军医大学邢金良教授、山东省肿瘤医院宋现让教授担任主编，上百位中国临床及医技专家参与编写。
液体活检技术具有克服肿瘤异质性、可多次取样、动态实时监测、微创或无创、高灵敏度和特异性的特点。该指南整合了现有多种肿瘤指南共识及经验总结，兼顾中国特色及原创性研究，旨在推动液体活检技术的研究、开发及规范应用，为液体活检技术在肿瘤早筛早诊、伴随诊断、预后评估、疗效监测、耐药评估、用药指导及术后复发转移风险评估的规范化临床应用提供指导。


循环肿瘤细胞（Circulating tumor cell，CTC）作为液体活检的主要标志物，CACA技术指南对其概念、检测方法和临床应用进行了全面介绍。其中，在指南的第三章CTC检测方法中纳入CTCBIOPSY检测技术，并对CTC鉴定的细胞病理学方法进行了重点介绍！

1 循环肿瘤细胞
循环肿瘤细胞是指从肿瘤病灶（原发灶或转移灶）脱落并进入外周血液循环的肿瘤细胞。肿瘤细胞突破周围屏障入血形成CTC是肿瘤进展的重要标志。这个细胞群体具有异质性，彼此间在细胞大小和形态、分子表型、活跃程度、转移潜能、增殖潜能等各方面都有不同。CTC可以单个细胞形式存在，也可彼此间聚集成细胞团/簇（CTC cluster）或与血液来源的细胞聚集成微小瘤栓（Circulating tumor microemboli，CTM），后两者形成转移瘤的能力是前者单个CTC的20-50倍。



图例展示CTCBIOPSY系统检测CTC不同细胞类型：(a)单个CTC；(b)CTC-cluster；(c)中性粒细胞CTM；

2 CTC检测方法
CTC检测技术主要由前期样本采集及质控、CTC富集分离及鉴定两个技术环节构成。
2.1样本采集及质量控制
CTC检测需要利用全血样本，一般在肘静脉采集。在健康人血液中CTC的存在也有报道，但是大部分健康人血液中应该检测不到CTC。肿瘤患者血液中CTC数量也不多，相对于血液细胞，属于痕量的存在，但个体差异较大。一般1 mL血液中CTC的数量在几个到几十个，早中期肿瘤患者CTC数量相应更低。CTC检测样本前处理包括样本采集、处理和储存的规范操作流程。
（1）全血样本采集、处理与储存
为保证CTC分离提取质量，一般使用加有细胞保护液的EDTA抗凝采血管，可使CTC在室温下保持稳定长达4天，以便运输、储存及集中处理。采集好血液后，将采血管迅速颠倒4-5下混匀，放置试管架上静置2-3 min待用。样本不可以冻融，因为冷冻会破坏细胞的完整性。某些富集技术需要进行样本前处理，包括裂解红细胞或密度梯度离心富集有核细胞，但是这些前处理方法有可能导致CTC的丢失。（CTCBIOPSY技术没有经过此类前处理，全血样本仅通过一步稀释后，直接上机进行负压过滤处理）
（2）质量控制
分离富集前应观察样本的质量，应该排除有明显凝血和溶血的血液样本。
2.2 常用CTC富集分离及鉴定技术
CTC与血细胞在物理特性、免疫特性等方面存在差异，从而构成富集分离CTC的理论基础。目前CTC富集分离技术主要包括生物特性富集（如阳性富集分离法，阴性富集分离法）与物理特性富集（如细胞大小、密度、介电性与变形性等）两大类。指南指出，CTCBIOPSY系统采用膜过滤法利用细胞大小和变形性差异进行CTC分离，是简捷的基于大小的CTC分离技术。


在血液中富集分离CTC后，一方面由于目前CTC捕获技术不能保证百分之百纯度，另一方面由于在肿瘤发生发展中CTC的数目和表面分子标志物会发生动态变化，因此后续还需结合有效的方法进行分析鉴定。CTC鉴定方法主要包括细胞形态学鉴定、免疫荧光染色、荧光原位杂交、聚合酶链式反应等。在“CTC鉴定和检测技术”论述部分对于CTCBIOPSY采用的细胞形态学鉴定方法也做了详细描述。


早在2017年，国内的临床及病理专家联合出版了基于CTCBIOPSY技术平台的《循环肿瘤细胞病理学图鉴与应用》CTC细胞学图谱。该图谱由中国科学院院士卞修武教授担任主编，为CTC的细胞病理形态判读制定了详细标准，解决了细胞形态学判读对于技术人员要求较高的问题，并且历经8年在100多家三甲医院的临床验证，已经成为CTC细胞形态学鉴定的临床重要参考工具。




3 CTC临床应用
CTC被认为是发生远处转移的“种子”，是肿瘤液体活检的主要材料之一，对肿瘤患者的预后判断、疗效预测、疗效评价及复发转移和耐药机制的研究都具有重要意义。
✔ 肿瘤早筛与早诊
CTC检测有利于癌症的早期发现和诊断，联合传统的筛查手段可进一步提高癌症诊断效能。
✔ 肿瘤伴随诊断
通过CTC下游检测可进行免疫治疗用药人群筛选以及疗效评估等指导，如通过CTC细胞上的PD-L1,、HER2、AR-V7、CLDN18.2等蛋白检测来进行伴随诊断，判断药物是否适用于患者。
✔ 肿瘤预后判断
CTC可以辅助用于临床肿瘤预后评估，CTC高计数、CTM和治疗期间CTC计数增加预示着肿瘤患者预后较差，此外，CTC分子分型如间质CTC表达或干性CTC与生存率较差相关。
✔ 肿瘤MRD监测
CTC可用于肿瘤患者术后复发或转移风险评估，以及个体化辅助治疗指导，可作为肿瘤MRD的检测标志物。

【参考文献】
[1] 樊代明著.《液体活检-中国肿瘤整合诊治技术指南（CACA）》：天津科学技术出版社，2023年版.
[2] 卞修武著.《循环肿瘤细胞病理学图鉴与应用》:华中科技大学出版社，2017年版.
作者 | 徐   凡
校对 | 吴   高
编辑 | 盛亚琴

免责声明：本账号的部分图片来源于网络，版权归其所有，侵必删。

继续前进

DCI.USA 美国杜克大学肿瘤研究所
唾液样本早筛，国内冷链空运美国，大连出发，10天左右出结果

长长的路

是可以的 我自己也去香港做这个癌症筛查了