分享一个初步的胶乳试剂包被方法

好窝 · 发表于 2013-4-18 12:36

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初步的胶乳试剂包被方法（抛砖引玉，抛砖引玉！！）

所需溶液：①. MES缓冲液 15mM，PH5.5

②. PBS缓冲液 15mM，PH7.4

③. PBS缓冲液 15mM，PH7.4，2‰BSA，0.1‰ NaN3

④. 微球，抗体，EDC。

步骤：

1. 用液①配制EDC溶液（1mg/ml）；

2. 用液①配制0.5ml的微球溶液（1%）。

3. 用液②配制1mg/ml的抗体溶液。

4. 搅拌条件下在0.5ml微球溶液中加入0.5ml的EDC溶液，室温反应15min。

5. 在1ml抗体溶液中逐滴加入活化好的微球溶液。

6. 室温包被反应2-4h。

7. 离心，10℃×20000g×25min。

8. 仔细分离上清液，用于检测剩余抗体含量。

9. 微球用2ml液③重悬，涡旋振荡或者超声混匀。

10. 室温搅拌封闭30-60min。

11. 离心，10℃×20000g×25min。

弃上清，微球用4-6ml液③重悬，涡旋振荡或者超声混匀。

千姿百态 · 发表于 2013-4-18 12:50

支持技术交流。

zhouchuibei · 发表于 2014-10-27 21:34

第五步应该是往微球中加入抗体吧？

rongk · 发表于 2014-12-25 05:53

非常感谢！！！

rongk · 发表于 2014-12-25 05:54

非常感谢！！！

梦里骑士 · 发表于 2016-1-18 21:26

厉害厉害，好多问题我最近才研究通，比我早了好多。

梦里骑士 · 发表于 2016-1-18 21:27

要是早点看到LZ的帖子，应该能少走不少弯路

ls1201 · 发表于 2016-12-9 14:12

去试试，我做的老是包被不上呢

kugewz · 发表于 2017-11-27 16:08

要是早点看到LZ的帖子，应该能少走不少弯路

老三 · 发表于 2019-2-25 21:42

zhouchuibei 发表于 2014-10-27
第五步应该是往微球中加入抗体吧？

结果是一样的

思玹华年 · 发表于 2019-8-1 14:24

楼主这是适用于大部分抗体吗，还是有针对性

冈多拉 · 发表于 2021-8-16 14:26

好早的帖子啊，挖一下~

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