立即注册找回密码

QQ登录

只需一步,快速开始

微信登录

微信扫一扫,快速登录

手机动态码快速登录

手机号快速注册登录

搜索

图文播报

查看: 2707|回复: 5

[分享] 如何选择合适的细胞培养基?

[复制链接]
发表于 2024-9-26 16:04 | 显示全部楼层 |阅读模式
回复

使用道具 举报

发表于 2024-9-26 16:04 | 显示全部楼层
培养基既是供给细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和增殖的环境,所以非常重要。细胞培养液是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了碳水化合物、氨基酸、脂类、无机盐、维生素、微量无素和细胞生长因子等。
根据其成分、用途和性质,培养基可以分为以下几类:
合成培养基:合成培养基的成分明确,营养全面,适用于各种细胞类型的培养。常见的合成培养基有MEM、DMEM、RPMI等。
天然培养基:天然培养基以动物血清或血浆为基质,添加一定量的营养成分,适用于某些特定细胞类型的培养。如添加了动物血清的DMEM称为血清培养基。
无血清培养基:指不含任何动物来源的血清成分,以减少潜在的传染病风险和提高实验的可重复性。无血清培养基通常需要添加特定的化学添加剂来模拟血清中的作用。目前已有多种无血清培养基上市,如杂交瘤细胞无血清培养基、CHO细胞无血清培养基、Vero细胞无血清培养基等。无血清培养基通常添加生长附加成分,如激素与生长因子、低分子营养成分和转铁蛋白等促细胞生长的附加成分,一般包括胰岛素、孕酮、硒酸钠、腐胺、转铁蛋白等。
悬浮培养基:悬浮培养基适用于悬浮生长类型的细胞,如骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞等。悬浮培养基中通常含有较少的营养成分,以维持细胞在悬浮状态下的生长。
实体培养基:实体培养基适用于贴壁生长类型的细胞,如细胞系、原代细胞等。实体培养基中通常含有较多的营养成分,以满足细胞在实体状态下的生长需求。
诱导分化培养基:诱导分化培养基用于促使细胞向特定方向分化的培养基。通过添加分化诱导剂或改变营养成分的组成,可以实现对细胞分化的调控。
低氧培养基:低氧培养基用于模拟低氧环境,适用于某些特定细胞类型的培养,如血管内皮细胞、肌肉细胞等。低氧培养基中通常含有较低浓度的氧气,以促进细胞在低氧条件下的生长和功能表达。
总之,培养基类型繁多,根据不同细胞类型和实验需求选择合适的培养基是成功进行细胞培养的关键。


那么,常用的培养液有哪些呢?它们的成分和特点是什么呢?它们各自的适用范围又有哪些呢?
一、常用培养基

提到常用的培养基,其实就四种: MEM、DMEM、1640、F-12这四种培养液涵盖了90%以上的细胞。下面,分别介绍一下它们各自的成分和特点。
MEM作为四大金刚中的老大,是应用最广泛的细胞培养液,其中含有13 种必须氨基酸、8 种维生素、以及多种微量元素。能力非常全面的,优点非常突出。
老二DMEM,作为紧跟老大MEM 的二弟,含有的营养成分其实是一模一样的。但是,老二青出于蓝而胜于蓝,浓度要高出2~4 倍。
老三1640,中规中矩,没有什么特别的优点,也没有什么明显的缺点。简单朴素,营养成分比较简单,比DMEM少一点糖和谷胱甘肽。
老四F12,它的优点是非常突出的,同时,它的缺点也是非常明显的。F12也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。这些都是优点。但是,F12中含有硫酸亚铁,据报道有神经毒效应。对于很多神经细胞是有毒性作用的。
二、不同的细胞用不同的培养基

MEM 可以用于绝大多数的细胞,特别适合于很多种哺乳动物细胞培养。 DMEM 是在MEM 的基础上发展而来的,double了原来各成分的含量。分高糖型(含葡萄糖4500mg/L)和低糖型(含葡萄糖1000mg/L)两种,高糖型适用于生长较快,附着性较差的肿瘤细胞,但是又不希望他脱离原来生长点的克隆培养,所以常用于杂交瘤技术中骨髓瘤细胞和DNA 转染的转化细胞。低糖型对于生长速度较快、附着性差的肿瘤细胞有利。1640 培养液最初为培养小鼠白血病细胞而制备。开始的配方特别适合悬浮细胞的生长,主要针对淋巴细胞。其组成较为简单。但是,正是因为其简单,才可以适应很多种类细胞的生长。特别是主要用于一些悬浮细胞培养以及monolayer culture of human leukemic cells。
1640和DMEM的区别
DMEM主要适用于肝脏、肾脏、肺、心脏等多种类型的哺乳动物细胞系的培养。DMEM中含有较高浓度的葡萄糖(4500mg/L)、氨基酸、维生素和微量元素等营养物质。
此外,DMEM还添加了丙酮酸和乳酸等缓冲剂,能够保持细胞在较宽的pH范围内正常生长。
RPMI-1640,适用于淋巴细胞、骨髓细胞、白血病细胞等多种类型的哺乳动物细胞系的培养。RPMI-1640中含有较低浓度的葡萄糖(2000mg/L)、氨基酸、维生素和微量元素等营养物质。此外,RPMI-1640还添加了缓冲剂HEPES和碳酸氢盐,能够保持细胞在较窄的pH范围内正常生长。
DMEM和RPMI-1640在营养成分和缓冲剂的配比上有所不同,上述提到它们各自适合培养的细胞种类是经过大量实验验证得到的结果,建议遵照执行即可。
但这也并不代表用错了培养基细胞就一定会死掉,因为DMEM和1640只是在少数成分上做了针对优化,对于大部分细胞株,即使用错,也只是不那么合适而已。
F-12,最初开发用于支持CHO、Hela 和L-细胞生长,F-12 还用于培养原代大鼠肝细胞和前列腺上皮细胞增殖。MEM和F12联手,还是神经生物学最通用的培养基呢。MEM 和 F12 这两种培养基各取1/2,就形成神经生物学最通用的培养基。已经成功的培养了外周神经元。
表1 不同的细胞系对应的不同的培养液




关于细胞培养液,一般的细胞系用 1640、DMEM 均可,90%以上的细胞都可以养的很好,包括原代肿瘤细胞。需要特殊培养基的细胞,在文献里一般都会注明的。大家照着文献选用即可。
三、如何选用特殊细胞系培养基?

培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在 MEM 中培养的细胞,很可能在 DMEM 或 M199 中同样很容易生长。总之,首选 MEM 做粘附细胞培养,RPMI-1640 做悬浮细胞培养是一个好的开始。
四、什么培养基中可以省去加酚红?

酚红在培养基中被用来作为 PH 值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。
五、细胞培养基的配制和储存应该注意什么?

细胞培养基配好后,要先抽取少许放入培养瓶内在37℃培养箱内放置24~48h,已检测培养液是否有污染,然后方可用于实验。配置培养基所需的血清要合格并且保持稳定。一个批号试用效果良好后,就可一次购入较多同一批号的血清,这样实验条件稳定,配液时调整pH值较容易。每次配液量以使用两周左右的量为宜,一次配液不要太多,一是短期内用不完造成营养成分损失需要补充,二是量大易造成污染。
六、为何培养基保存于 4 ℃ 冰箱中,颜色会偏紫色?

培养基保存于 4 ℃ 冰箱中,培养基内的 CO2 会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性,而培养基中的酸碱指示剂 (通常为 phenol red) 的颜色也会随碱性增加而更偏紫色。培养基偏碱的结果, 将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时,可以通入无菌过滤 CO2,以调整 pH 值。
七、什么情况下用到无血清培养基?

对于应用培养细胞进行分离制备细胞生长因子、单克隆抗体等应该选择无血清培养基。
回复 支持 反对

使用道具 举报

发表于 2024-9-26 16:05 | 显示全部楼层
细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。本期为大家整理了常见的细胞培养基种类,接下来我们一起来了解一下这些培养基和适用的细胞类型及选择方法。
<hr/>一、常见的细胞培养基

基础培养基(MM)

基础细胞培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞保持良好的生长状态。
培养基的种类有很多,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12是应用较为广泛的。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。
具体的特征及应用如下:
培养基特征应用
BME细胞培养基1955年Eagle设计,以BSS为基础,添加8种维生素,13种氨基酸,成分简单、便于添加适于各种细胞系和特殊研究用,在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM等
MEM细胞培养基由Harry Eagle在Eagle基本培养基(BEM)的基础上发展而来的。MEM培养基仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,成分简单,主要用于贴壁细胞的培养,1959年修改配方,删去赖氨酸、生物素,增加氨基酸浓度,配方修改后也可用于其他类型细胞培养适合多种细胞单层生长,是一种最基本、适用范围最广的培养基。因其营养成分所限,针对生产之特定细胞培养与表达时,并不一定是使用效果最佳或者最经济的培养基。此外,MEM细胞培养基有含Earle's平衡盐的类型,也有含Hanks'平衡盐的类型;有高压灭菌型的,也有过滤除菌型的;还有含非必需氨基酸的类型。应根据实际情况注意选择合适的 MEM 细胞培养基
M199细胞培养基1950 年由 Morgan 等设计,除 BSS 外,含有53 种成分添加适量的血清后,可广泛用于多种细胞培养,可用于病毒学、疫苗生产以及大鼠胰腺上皮细胞和小鼠晶状体组织的培养
DMEM细胞培养基由Dulbecco改良的 Eagle 培养基,DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及丙酮酸钠。分低糖型(1000mg/L)、高糖型(4500mg/L)常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和 DNA 转染的转化细胞培养。例如 CHO 细胞表达生产乙肝疫苗、CHO 细胞表达EPO
IMDM细胞培养基由Iscove's改良的Eagle培养基,IMDM培养基在DMEM培养基的基础上添加了硒、HEPES、丙酮酸钠以及额外的氨基酸和维生素,营养非常丰富可用于杂交瘤细胞和高密度细胞的快速培养
RPMI-1640细胞培养基Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,针对淋巴细胞培养设计,BSS+21种氨基酸+维生素11种等成分广泛应用于各种正常细胞和癌细胞的培养,尤其是悬浮细胞的培养
Ham's F10、F12细胞培养基1963年、1969年由Ham设计,含微量元素,Ham's F-12以Ham's F-10营养混合物为基础设计而成的,可在血清含量低时用F10适用于仓鼠、人二倍体细胞,F12适用于CHO细胞。在低血清含量下时,特别适合单细胞培养和克隆化培养,添加血清后也广泛应用于癌细胞和原代细胞的培养,如大鼠肝细胞、大鼠前列腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞、鸡胚胎细胞等
DMEM/F12细胞培养基在DMEM培养基的基础上,添加F12培养基中更为丰富的营养成分,含有多种微量元素广泛应用于多种哺乳类细胞的培养。同时,常作为开发无血清培养基的基础,也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养
McCoy's 5A培养基Thomas McCoy等人在1959年设计的培养基,最初专门用于Novikoff Hepatoma细胞的培养。McCoy's 5A培养基是改良的Basal Medium 5A,与其他培养基不同的是,McCoy's 5A含有还原型谷胱甘肽、细菌蛋白胨以及高浓度的葡萄糖McCoy's 5A广泛用于多种类型的原代细胞的培养,如骨髓、皮肤、牙龈、肾、脾、肺、大鼠胚胎、网膜等。此外McCoy's 5A培养基还用于组织活检培养、细胞建系,以及一些淋巴细胞和较难培养的细胞的培养
L15细胞培养基L-15培养基的缓冲系统由磷酸盐和游离碱基氨基酸组成,代替了传统的碳酸氢钠缓冲系统,同时,用半乳糖和丙酮酸钠代替葡萄糖可以防止酸性代谢副产物的形成,有助于维持培养液PH的稳定,适合用于非CO2平衡环境的细胞培养L-15培养基适用于猴肾细胞和HEP-2的培养、原代(如胚胎和成人组织)细胞分离、多种病毒的培养以及神经元的培养等
<hr/>完全培养基(CM)

完全培养基是在基础培养基中添加了血清、抗生素等物质,也叫(血清)细胞培养基。其中大部分细胞培养常用的是牛血清,因为牛血清中含有促进细胞增殖的各种生长因子。此外为防止污染,培养液中尚需加一定量的抗生素。
完全培养基根据添加血清量的多少,可分为细胞生长培养基和细胞维持培养基,用于不同细胞和不同研究。
<hr/>无血清细胞培养基(SFM)

无血清培养基是指在合成培养基的基础上引入成分完全明确或部分明确的血清替代成分,主要是由基础培养基和添加物(替代血清的补充因子)组成。其主要成分为下列几种:
黏附因子
约有80%的细胞是属于贴附型生长。一般的细胞培养基是利用血清作为其来源,在无血清培养基中,细胞黏附因子就是很重要的物质。
生长因子
生长因子是维持细胞活性与促进细胞增生、迁移、分化等,不可或缺的要素。
酶抑制剂
贴附型细胞一般多以胰蛋白酶(trypsin)进行传代。在一般细胞培养中,血清中含有抑制trypsin的成分,所以无血清培养基必须添加trypsin抑制剂。
细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,以保证细胞的特性不发生变化。

优点:
01 未知组分少;
02 避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染;
03 杂蛋白含量少,避免血清成分影响研究结果或是产品制程,提高产品表达水平并易于纯化。

缺点:
01 无血清培养基成本较高;
02 不是所有的细胞都能在无血清培养基中培养;
03 细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基保存和应用方面局限性很大。
<hr/>二、细胞培养基的选择

细胞培养基的种类很多,如何选择适宜的培养基是细胞培养的关键。在此提供以下建议可供参考:
01 如果是新购买的细胞,可以向细胞株的厂家咨询,或者询问引种来源查找细胞库上对应的培养基;
02 根据细胞的特点及实验的需要来选择培养基;
03 自己试验,用多种培养基培养细胞,做生长曲线,记录细胞的生长速度,观察细胞的形态变化,根据实验结果选择最佳培养基。
<hr/>培养基种类和细胞系并不是一个强制的对应关系。具体培养细胞使用什么培养基,主要还是根据数据库、文献和经验哦!
回复 支持 反对

使用道具 举报

发表于 2024-9-26 16:06 | 显示全部楼层
细胞培养是生命科学研究中的重要一环,而培养基则是细胞培养的基础。不同类型的细胞需要不同种类的培养基,因此正确选择培养基对于细胞的生长和繁殖至关重要。

1、RPMI-1640 Medium

RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

2、Minimum Essential Medium(MEM)
    也称非必需培养基,它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型,而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。

3、DMEM-高糖(标准型)是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。

4、DMEM-低糖(标准型)是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。




5、DMEM/F12
DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mM HEPES缓冲液。

6、McCoy’s 5A
McCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。

7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)
Guilber 和Iscove将Dulbecco’ Medium 改良为  Iscove’s  Medium,用于培养红细胞和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM还能够促进小鼠B淋巴细胞,LPS刺激的B细胞,骨髓造血细胞,T细胞和淋巴瘤细胞的生长。IMDM为营养非常丰富的培养液,因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。

8、M-199 Medium
1950年,Morgan成功研制出具有确定化学成分的细胞培养液,即M-199,主要用于鸡胚成纤维细胞培养。此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞。

9、Leibovitz Medium (L-15)
L-15培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养,用于在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株。此培养液采用磷酸盐缓冲体系,氨基酸组成进一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。

10、Ham’s F-10培养基:适应小鼠细胞、人类二倍体的培养。

11、Ham’s F-12培养基:可以在加入很少血清的情况下应用,特别适合单细胞培养和克隆化培养,是无血清培养中常用的基础培养液。

12、William’s Medium E:用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。

13、MCDB 131 培养液:用于培养内皮细胞。

14、Opti-MEM I Reduced Serum Media:用于培养造血细胞。

15、植物血凝素(PHA):增加细胞转化和DNA合成。

苏州阿尔法生物
主要有:HyCyte™ 干细胞、原代细胞、细胞系、三系诱导培养试剂、专用培养基、细胞培养基、基因编辑试剂盒、细胞株现货、细胞专用血清等细胞生物学试剂。

细胞培养基-DMEM培养基-细胞系购买-F12培养基-苏州阿尔法生物实验器材有限公司
回复 支持 反对

使用道具 举报

发表于 2024-9-26 16:06 | 显示全部楼层
关注公众号“医学科研小坑”,了解更多相关科研技术内容!
实验室新来了一个师弟,老板让其从养细胞开始。这个小师弟是个夜猫子,总喜欢深夜做实验。一天早上:
小师弟:湿胸,昨天传的细胞没贴壁,培养液变成紫红色的了。是不是你给我的那皿细胞是不好的?
科研狗:你操作没毛病?
小师弟:绝对没毛病,严格遵循你的指示。为了怕孵箱细胞太多,我特意单独放在另外一个孵箱里。
科研狗:等等,另外一个孵箱?没有接通CO2啊
今天我们来聊一聊培养液中的颜色,一般情况下,我们购买回来的DMEM培养基都是鲜红色的,如下图:


但是,作为老司机的你肯定也见过如下颜色的:



还有这样颜色的:


小师弟:师兄,你见过赤橙黄露青蓝紫的吗?
科研狗:...
1. 为什么这个DMEM培养基是鲜红色的?
这个问题可以从如下两个方面来回答:
业余回答:
A 它总要有一个颜色吧,如果是绿色的或者你会问他为什么是绿色的
B 红色的看上去有食欲,细胞自然喜欢吃了。你想想,给你一堆绿了吧唧的水果和给你一堆鲜红的水果,你喜欢吃哪一种?
专业回答:
培养基的颜色主要是酚红来显示的,酚红指示颜色非常灵敏,p值范围为6-8,颜色由黄变为紫红。酚红不是必须的,在有些情况下甚至是多余的,酚红有类似固醇类激素的作用,如果涉及到固醇类激素相关的细胞培养,最好不要添加。但是为了培养方便,能让我们直观地感觉培养液的状况,加入酚红后,如果培养液偏酸了,就显示偏黄色,偏碱性了就显示偏紫色。
2. 为什么培养皿放在一个没有开启CO2的孵箱里面,培养液颜色偏紫色?
一般的DMEM使用的缓冲体系是NaHCO3, 初中的时候应该见过如下的方程
2NaHCO3=Na2CO3+CO2+H2O
在没有CO2的孵箱中,培养液中的CO2一直溢出,碳酸变少了,溶液变碱性了,就偏紫色了。同时我们打开了很久的DMEM瓶里面的培养液也会慢慢偏紫色,也就是这个道理。
3. 什么时候溶液会变为黄色?
这个简单,一般污染细菌的时候或者长时间不换液,溶液变为黄色主要是酸性物质太多,细菌和细胞过度增长都会产生酸性物质,溶液会变为黄色。
4. 培养基偏紫色了还能用不?
可以将该偏紫色的培养基置于CO2孵箱中,拧松瓶盖。一段时间之后你会发现颜色变为鲜红色了,那么可以继续接着用。但是不要使用过长时间未用完并且变色的培养液,置于空气下氧化之后培养基成分可能已发生了变化。
5. 哪些情况下不得使用酚红?
如前面所说的酚红有类似固醇类激素的作用,如果涉及到固醇类激素相关的细胞培养,不要添加。另外在做流式细胞的时候,酚红会对结果产生影响,因此也不要添加。
6. 有没有不受CO2影响的培养基?
有,如果缓冲体系不是NaHCO3,而是其他体系如HEPES,就不受CO2的影响。
7. 常用的培养基有哪些?
MEM(Minimum Essential Medium): 也称最低必须培养基,它仅含有12种必须氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。可以广泛应用到各种细胞培养。
DMEM:分为高糖和低糖,碳酸氢钠缓冲体系,所以需要CO2。
高糖的适合于高密度悬浮细胞培养,适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的细胞。低糖的适合于生长速度较快,附着性较差的肿瘤细胞培养。
DMEM/F12:F12 培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较条件下哺乳动物细胞培养。
RPMI-1640:主要用于悬浮细胞培养,广泛用于哺乳物,特殊造血细胞,正常或者恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞。另外K-562, L-60、urkat、IM-9 等淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞也可以使用。
McCoy’s 5A : 主要用于肉瘤细胞的培养, 还可以用于骨髓、皮肤、肺等原代培养,用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。比如HT29,BHL100等上皮细胞。
IMDM(Iscove’s Modified Dulbecco Medium):主要用于红细胞和巨噬细胞前体培养。培养液中含有微量元素硒以及额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠以及HEPES。
M199 Medium 是具有确定化学成分的细胞培养液,主要用于鸡胚成纤维细胞培养,培养时必须辅助血清才能长期培养。
L-15(Leibovitz Medium) 适用于在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株,用于快速增值瘤细胞的培养。
Ham’s F-10: 适用于小鼠细胞以及人的二倍体细胞的培养
Ham’s F-12: 适用于单细胞培养或者克隆培养, 是无血清培养基中常用的基础培养基。
MCDB131:适用于培养内皮细胞。
Opti-MEM I Reduced Serum Media: 适用于培养造血细胞。
本文转自科研狗
回复 支持 反对

使用道具 举报

发表于 2024-9-26 16:07 | 显示全部楼层
要如何正确选择细胞培养板呢?

1、孔的数量
根据不同的实验背景以及筛选通量去确认培养板的孔数,例如 WB、流式检测相关,需要较多的细胞样本量,最终的检测通量较低,一般会选择 6 孔板、24 孔板;而实验通量较高,最终的检测手段可以实现自动化,多数可以选择 96 孔板或者 384 孔板,例如:CTG 实验、CCK8 实验等。
2、孔的形状
一般贴壁细胞的培养,进行成像或分光光度的测定首选平底的培养板;而悬浮细胞的培养,为防止细胞的附着,需要使用 U 底的培养板。
3、孔板颜色
发光检测—白色微孔板;以便最大限度提高信号的反射率。荧光检测—黑色微孔板;以吸收激发信号,可以防止相邻孔之间的信号串扰。顶部读数—底部不透明的微孔板。显微镜或底部读数—底部透明的微孔板。
4、表面处理技术
贴壁细胞需要使用TC表面,微孔板底部经过特殊技术处理更为亲水,有助于细胞贴壁,推荐赛默飞NUNC Nunclon Delta系列相关培养板;而悬浮细胞需要非TC处理表面;对于3D细胞和类器官的培养,需要使用Nunclon Sphera超低吸附表面,支持多种细胞生成球体,且已证实在类器官培养方面效果显著。
5、细胞培养板小TIP: 测吸光度可以用细胞培养板吗?酶标板和细胞培养板有什么区别?
细胞培养板可以进行吸光度的检测,经常用它来做样品的蛋白定量等。酶标板一般要比细胞培养板贵,细胞板主要做细胞培养,但也可以用来测蛋白浓度;酶标板包括包被板和反应板,一般不能用做细胞培养,它主要做酶联免疫反应后的蛋白检测,它需要更高的要求还需要特定的酶标工作液。
回复 支持 反对

使用道具 举报

发表回复

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册 微信登录 手机动态码快速登录

本版积分规则

关闭

官方推荐 上一条 /3 下一条

快速回复 返回列表 客服中心 搜索 官方QQ群 洽谈合作
快速回复返回顶部 返回列表