银环蛇咬伤致肌无力SD大鼠模型

科研CRO

世界上现存蛇类大约有3000余种，其中毒蛇超过600种，致命性毒蛇近200种，分为18个科、大约450多个属。蛇类主要分布于北纬67°到南纬40°的区域内，其中种类和数量最多的分布在亚热带和热带地区。据报道，我国每年毒蛇咬伤事件可达10万人次，因蛇咬伤致残而丧失劳动能力者占25%～30%，各类蛇咬伤死亡率达5%～10%，严重威胁着人们的生命健康。今天我们一起梳理银环蛇咬伤模型。

一、实验动物

KM小鼠和SD大鼠。

二、实验方案

1、银环蛇毒的KM小鼠半数致死量（LD50）为0.09mg /kg，测定本实验银环蛇干毒KM小鼠LD50，根据公式换算为银环蛇毒的SD大鼠LD50 ; 按银环蛇毒的SD大鼠的LD50倍数，予SD大鼠皮下注射，建立银环蛇毒致SD大鼠肌无力模型，确定模拟临床的最佳银环蛇干毒剂量。

按Lennon等的分级法将肌无力症状分为4级：

• 0级，没有肯定肌无力表现；
• 1级，嘶咬无力，四肢力量较差，在光滑地面上前肢打滑，活动减少；
• 2级，明显无力，休息时脊背呈隆起姿势，头尾下垂、前肢弯曲，动作不协调；
• 3级，严重无力表现，无嘶咬动作，肌肉震颤，呼吸困难，濒死或死亡。
  
  

2、用低频重复神经电刺激检测银环蛇毒致SD大鼠肌无力模型的腓肠肌电改变; 解剖模型大鼠，观察膈肌及腓肠肌病理改变。

实验流程见图1。

图1 银环蛇毒的KM小鼠LD50的测定

三、建立银环蛇毒致SD大鼠肌无力的中毒动物模型

确定银环蛇毒致SD大鼠肌无力模型的剂量

（1）银环蛇毒最佳剂量是3倍SD大鼠LD50，为0.24mg /kg给 SD大鼠皮下注射已配置的银环蛇毒溶液（浓度10μg /mL）。

SD大鼠于1.5h左右出现呼吸困难，2h左右出现张口呼吸，模拟临床1～4h出现呼吸衰竭，用于早期救治银环蛇干毒相关性早期肌无力的基础研究。

（2）进行RNS检查，SD 大鼠为给予0.24mg/kg银环蛇毒注射的 SD大鼠，行RNS检查，中毒后，可见肌电递减改变。

（3）病理结果

高倍镜（×200）下模型组膈肌及腓肠肌细胞肿胀、核排列紊乱。对照组的膈肌与腓肠肌细胞形态未见异常。