谈谈新冠病毒检测试剂开发

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  从2019年12月份开始，到目前为止，关于新型冠状病毒的战役还在持续进行，并未有减退的迹象。关于冠状病毒的检测，很多IVD生产企业也是达到了白热化的一个阶段。

  大家知道，对于传染病的检测，在爆发初期，无疑核酸检测是应用在最前面的，此时大多数感染者尚未有抗体产生，只能通过检测病人唾液或其他样本中的病毒核酸序列来确诊。然而从前线传来的消息是不同厂家的核酸检测试剂质量良莠不齐，而且整体的检出率都很低，只有30-50%，只能借助CT联合诊断，给医生带来了极大的麻烦。而且，大多数核酸试剂的诊断时间都需要1个小时以上，无疑也是个痛点。现在疫情爆发了差不多有一个多月的时间了，大多数感染者的身体内已经有IgM甚至IgG抗体产生了，因此很多企业开始了IgM和IgG抗体检测试剂的开发，这也是临床检验的趋势。

  目前有很多的企业使用了各种各样的方法，我们以广州万孚和北京热景生物公司为例，大概讲一讲目前试纸条研发的基本概况。

  我们知道，对于冠状病毒，有很规则的蛋白结构，S-E-M-N，对于诊断试剂的开发而言，我们就是需要在病毒身上找到这样一个抗原，可溶性很好，表达很简单，免疫原性强，相对较保守等等。我们分析4个蛋白，S蛋白是一种糖蛋白，也就是病毒身上的刺，又分为S1（含RBD）和S2，目前有个别大厂家在售（大多数厂家还未表达出来），因为它是一个糖蛋白，需要真核表达，蛋白活性跟糖基团有很大关系，所以很多厂家不想去做，因为对蛋白活性的判断很难把控；对于E（胞膜蛋白）和M（膜蛋白），水溶性很差，基本上不会有人去做；对于N（核衣壳蛋白），做的厂家最多，为什么，因为原核表达效果就很好，但是有一个问题就是，核蛋白是存在于病毒的膜内的，在感染人体细胞的时候，只有在细胞破裂时，未组装的核蛋白才有机会被免疫系统识别，而S蛋白才是最纯粹的暴露在体液环境中的，因此，理论上讲，S蛋白的作为中和抗体对应的免疫原最好，但是就是因为其重组表达活性的问题，所以大多数厂家几乎都用的N蛋白作为诊断抗原。

  广州万孚公司注册的有两个产品，一个是双抗夹心检测呼吸道样本的病毒抗原，另一个时检测血清抗体。作为一个研发人员，我觉得它的第一个试剂好像有些不妥。因为目前单抗制备技术好像还达不到那么快，即使用多抗的话，想检查病毒抗原那也不是个容易的事，病毒的复制基本上都是在肺部，想通过咽拭子上的一点点样本检测出病毒蛋白，不是件易事，检出率应该非常差，有条件的可以试试。IgM和IgG抗体检测才是最靠谱的。

	结合垫	T1	T2	C
1	鼠抗人IgM /IgG	N-Pro	/	羊抗鼠IgM /IgG
2	N-Pro	抗人IgM	抗人IgG	N-Pro Ploy Ab
3	N-Pro	N-Pro	/	N-Pro Ploy Ab

第一种一般是做单独的IgM或IgG检测时使用，由于不能同时检测，故用的人不是很多；
第二种是第一种方法的改进，优点是可以同时检测IgG和IgM；
第三种是热景最近新开发的双抗原夹心检测总特异抗体，效果不是很清楚。

SPHERE-MFCIS

楼主说的确实，层析测试的话，目前还是测血液中igm和igg靠谱一些～咽拭子取样的问题在以前sars那会就有人做了数据统计，确实漏检较多